[發(fā)明專利]含檢測(cè)GFOD2的骨質(zhì)疏松血液診斷試劑及其應(yīng)用

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201610116151.2
• 申請(qǐng)日: 2016-03-01
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN105506172B
• 公開(kāi)（公告）日: 2019-04-09
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 楊添祎;楊承剛
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 北京泱深生物信息技術(shù)有限公司
• 主分類號(hào): C12Q1/6883
• 分類號(hào): C12Q1/6883;G01N33/68
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本發(fā)明涉及含檢測(cè)GFOD2的骨質(zhì)疏松血液診斷試劑及其應(yīng)用。發(fā)明人對(duì)9例骨質(zhì)疏松患者外周血樣本及6例健康人對(duì)照外周血樣本進(jìn)行高通量測(cè)序，結(jié)合生物信息學(xué)方法進(jìn)行基因篩選，挑選出候選基因GFOD2，分子驗(yàn)證結(jié)果證實(shí)GFOD2基因在骨質(zhì)疏松患者外周血中低表達(dá)。本發(fā)明提示檢測(cè)外周血中致病靶點(diǎn)基因?qū)⑤o助臨床骨質(zhì)疏松的診療，為骨質(zhì)疏松診斷、治療及預(yù)測(cè)提供了新的解決方案。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及生物醫(yī)藥領(lǐng)域，具體涉及含檢測(cè)GFOD2的骨質(zhì)疏松血液診斷試劑及其應(yīng)用。

背景技術(shù)

骨質(zhì)疏松癥(Osteoporosis)是由各種原因?qū)е碌墓橇繙p少，骨組織微結(jié)構(gòu)破壞，骨骼脆性增加，易于發(fā)生脆性骨折的一種全身性骨病。美國(guó)國(guó)立衛(wèi)生研究院把骨質(zhì)疏松癥定義為“以骨強(qiáng)度下降而易于骨折為特征的骨骼系統(tǒng)疾病。其主要病理表現(xiàn)為松質(zhì)骨骨小梁變細(xì)、斷裂和數(shù)量減少，皮質(zhì)骨多孔、骨質(zhì)結(jié)構(gòu)紊亂。依據(jù)發(fā)病的原因不同，骨質(zhì)疏松可分為:原發(fā)骨質(zhì)疏松和繼發(fā)骨質(zhì)疏松兩類。原發(fā)性骨質(zhì)疏松，臨床上比較多見(jiàn)，主要分為3種：婦女絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松癥、老年性骨質(zhì)疏松癥和特發(fā)性骨質(zhì)疏松癥。繼發(fā)性骨質(zhì)疏松癥主要由于以下因素引起：內(nèi)分泌因素、過(guò)多使用激素類藥物、營(yíng)養(yǎng)因素、機(jī)體疾病因素以及其他因素。骨質(zhì)疏松癥本質(zhì)上是一種骨重建障礙的疾病，導(dǎo)致的骨量減少(骨密度降低)、骨質(zhì)結(jié)構(gòu)改變和骨轉(zhuǎn)換失衡構(gòu)成了骨質(zhì)疏松癥的病理基礎(chǔ)。研究骨質(zhì)疏松病理的分子機(jī)制，探究異常表達(dá)的特異性基因與疾病之間的關(guān)系，有助于深入了解疾病的發(fā)病機(jī)制，有利于骨質(zhì)疏松的早期診斷及預(yù)后。

為解決目前骨質(zhì)疏松分子標(biāo)記稀缺的問(wèn)題，發(fā)明人對(duì)9例骨質(zhì)疏松患者外周血樣本及6例健康人對(duì)照外周血樣本進(jìn)行高通量測(cè)序，結(jié)合生物信息學(xué)方法進(jìn)行基因篩選，挑選出候選基因GFOD2。進(jìn)一步，本發(fā)明進(jìn)行了分子生物學(xué)方法證實(shí)了GFOD2與骨質(zhì)疏松病的關(guān)系：GFOD2在骨質(zhì)疏松患者外周血中低表達(dá)，與骨質(zhì)疏松病具有很好的相關(guān)性。血清檢測(cè)有創(chuàng)傷小、方法簡(jiǎn)便、結(jié)果可靠等優(yōu)點(diǎn)，檢測(cè)外周血中GFOD2為骨質(zhì)疏松診斷、治療及預(yù)測(cè)提供了新的解決方案。本發(fā)明提供的候選基因GFOD2可用于制備骨質(zhì)疏松輔助診療制劑，有望成為骨質(zhì)疏松臨床治療的潛在基因治療靶點(diǎn)，具有良好的應(yīng)用前景。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的在于提供GFOD2基因和/其表達(dá)產(chǎn)物在制備骨質(zhì)疏松診斷和/或治療制劑中的應(yīng)用。

本發(fā)明的目的在于提供檢測(cè)GFOD2基因和/其表達(dá)產(chǎn)物在制備骨質(zhì)疏松診斷制劑中的應(yīng)用。

進(jìn)一步，骨質(zhì)疏松診斷制劑檢測(cè)外周血中GFOD2基因和/或其表達(dá)蛋白的表達(dá)情況。

為實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明首先通過(guò)高通量測(cè)序結(jié)合生物信息學(xué)方法篩選到候選基因GFOD2，進(jìn)一步通過(guò)分子生物學(xué)方法驗(yàn)證了GFOD2與骨質(zhì)疏松的關(guān)系：GFOD2在骨質(zhì)疏松患者外周血中低表達(dá)，與骨質(zhì)疏松病具有很好的相關(guān)性，可用于制備治療骨質(zhì)疏松制劑和/或骨質(zhì)疏松診斷制劑，具有重要的臨床應(yīng)用價(jià)值。

本發(fā)明的目的在于提供GFOD2基因在制備骨質(zhì)疏松診斷制劑中的應(yīng)用。

進(jìn)一步，所述的骨質(zhì)疏松的診斷制劑包括用熒光定量PCR方法、基因芯片方法檢測(cè)骨質(zhì)疏松外周血中GFOD2基因的表達(dá)。

熒光定量PCR法是通過(guò)熒光染料或熒光標(biāo)記的特異性的探針，對(duì)PCR產(chǎn)物進(jìn)行標(biāo)記跟蹤，實(shí)時(shí)在線監(jiān)控反應(yīng)過(guò)程，結(jié)合相應(yīng)的軟件可以對(duì)產(chǎn)物進(jìn)行分析，計(jì)算待測(cè)樣品模板的初始濃度。熒光定量PCR的出現(xiàn)，極大地簡(jiǎn)化了定量檢測(cè)的過(guò)程，而且真正實(shí)現(xiàn)了絕對(duì)定量。多種檢測(cè)系統(tǒng)的出現(xiàn)，使實(shí)驗(yàn)的選擇性更強(qiáng)。自動(dòng)化操作提高了工作效率，反應(yīng)快速、重復(fù)性好、靈敏度高、特異性強(qiáng)、結(jié)果清晰。