[發(fā)明專利]產(chǎn)纖維素酶放線菌及應(yīng)用

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201610114479.0
• 申請(qǐng)日: 2016-03-01
• 公開（公告）號(hào): CN105624066B
• 公開（公告）日: 2019-08-09
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 李巖;解志紅;王玲玲;韓京龍;劉衛(wèi);任承鋼
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 中國科學(xué)院煙臺(tái)海岸帶研究所
• 主分類號(hào): C12N1/20
• 分類號(hào): C12N1/20;C12N9/42;C12R1/04
• 代理公司: 沈陽科苑專利商標(biāo)代理有限公司 21002
• 代理人: 李穎;周秀梅

本發(fā)明涉及高效纖維素酶產(chǎn)生菌及產(chǎn)酶條件，具體的說是一株產(chǎn)纖維素酶放線菌及產(chǎn)酶條件。放線菌(Streptomyces sp.)YIC24，已于2015年12月9日保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會(huì)普通微生物中心(簡(jiǎn)稱CGMCC，地址為：北京市朝陽區(qū)北辰西路1號(hào)院3號(hào))，其保藏編號(hào)為CGMCC No.11848。本發(fā)明菌株生長(zhǎng)速度快，纖維素酶活高，產(chǎn)酶能力強(qiáng)，不會(huì)對(duì)自然界的碳循環(huán)產(chǎn)生負(fù)面影響，不會(huì)對(duì)環(huán)境造成危害，是應(yīng)用于秸稈腐熟生產(chǎn)有機(jī)肥料、秸稈還田、促進(jìn)生態(tài)恢復(fù)和保護(hù)生態(tài)環(huán)境、飼料加工等行業(yè)的好材料。在農(nóng)林廢棄物回收利用過程中可發(fā)揮重要作用。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及產(chǎn)纖維素酶，具體的說是產(chǎn)纖維素酶放線菌及應(yīng)用。

背景技術(shù)

纖維素是自然界中分布最為廣泛、產(chǎn)量最為豐富的可再生資源，廣泛存在于植物的根莖葉中。我國是農(nóng)業(yè)大國，每年秸稈產(chǎn)量約為7億噸左右，秸稈中的主要成分為纖維素。纖維素降解后可轉(zhuǎn)化為生物燃料、優(yōu)質(zhì)飼料等物質(zhì)。然而在自然界中，纖維素降解困難，主要源于其特殊的結(jié)構(gòu)。纖維素是由葡萄糖通過β-(1，4)糖苷鍵連接而成的線狀大分子聚合物。纖維素酶是能夠?qū)⒗w維素降解為葡萄糖的一類酶的總稱，根據(jù)其催化功能分為三大類：1)葡聚糖內(nèi)切酶(1，4-β-D-glucan glucanohydrolase)：該酶能夠隨機(jī)切割纖維素多糖鏈內(nèi)的無定型區(qū)，產(chǎn)生不同長(zhǎng)度的寡糖和新鏈末端；2)葡聚糖外切酶(1，4-β-D-glucancellobilhydrolase)：作用于纖維素還原性和非還原性的纖維素多糖鏈的末端，產(chǎn)生葡萄糖或纖維二糖；3)β-葡聚糖苷酶(β-1，4-glucosidase)：該酶功能為水解纖維二糖產(chǎn)生葡萄糖。由于纖維素酶的三個(gè)組分經(jīng)過協(xié)同作用，將大分子的纖維素降解為低分子量的寡糖、雙糖或多糖，而被廣泛應(yīng)用于食品加工、釀造、造紙、飼料添加劑、紡織、醫(yī)藥等工農(nóng)業(yè)領(lǐng)域。使得纖維素酶成為酶制劑工業(yè)中的一個(gè)新的增長(zhǎng)點(diǎn)。纖維素酶主要由微生物產(chǎn)生，受制于纖維素酶制劑工業(yè)化生產(chǎn)的因素主要有菌種和酶活及產(chǎn)量，因而高酶活微生物的篩選和產(chǎn)酶條件的優(yōu)化尤為重要。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的是提供一種高效產(chǎn)纖維素酶放線菌及其應(yīng)用。

為實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用的技術(shù)方案為：

一種高效產(chǎn)纖維素酶放線菌，放線菌(Streptomyces sp.)YIC24，已于2015年12月9日保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會(huì)普通微生物中心(簡(jiǎn)稱CGMCC，地址為：北京市朝陽區(qū)北辰西路1號(hào)院3號(hào))，其保藏編號(hào)為CGMCC No.11848。

所述產(chǎn)纖維素酶放線菌分離自粉碎的蘋果樹枝條自然發(fā)酵腐熟的木屑中，通過纖維素酶活的測(cè)定及菌種鑒定表明，該菌是一株產(chǎn)酶能力強(qiáng)、纖維素酶活高的放線菌菌(Streptomyces sp.)。對(duì)該菌進(jìn)行16S rRNA基因序列分析，并通過在GenBank中比對(duì)發(fā)現(xiàn)，本發(fā)明的放線菌擴(kuò)增的16S rRNA序列與Streptomyces diastaticus subsp.ardesiacusNRRL B-1773^T(登錄號(hào)：KJ706443)相似性最高，為99％。從而將分離出來的放線菌菌命名為Streptomyces sp.YIC24。

所述放線菌(Streptomyces sp.)YIC24在生產(chǎn)纖維素酶中的應(yīng)用。

進(jìn)一步的說，將所述放線菌(Streptomyces sp.)YIC24于羧甲基纖維素鈉產(chǎn)酶培養(yǎng)基中培養(yǎng)獲得纖維素酶。

更進(jìn)一步的說，將所述放線菌(Streptomyces sp.)YIC24在pH＝7、羧甲基纖維素鈉濃度為12.5g/L、NaNO₃濃度為5g/L的羧甲基纖維素鈉產(chǎn)酶培養(yǎng)基中培養(yǎng)獲得纖維素酶。產(chǎn)酶培養(yǎng)基中酶活最強(qiáng)，濾紙酶活達(dá)21.68±0.67IU/mL，內(nèi)切酶酶活達(dá)19.37±1.26IU/mL，外切酶酶活達(dá)29.21±0.98IU/mL。

本發(fā)明所具有優(yōu)點(diǎn)：