[發明專利]一種內皮培養體系

在審

• 申請號: 201610113482.0
• 申請日: 2016-03-01
• 公開（公告）號: CN105647851A
• 公開（公告）日: 2016-06-08
• 發明（設計）人: 王悅
• 申請（專利權）人: 賽百慷（上海）生物技術股份有限公司
• 主分類號: C12N5/071
• 分類號: C12N5/071
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術領域

本發明特別涉及一種內皮培養體系，屬于大血管內皮細胞培養技術領域。

背景技術

內皮細胞或血管內皮是一薄層的專門上皮細胞，由一層扁平細胞所組成，呈多邊 形，細胞的邊緣呈鋸齒狀，相互嵌合，它形成血管的內壁，是血管管腔內血液及其他血管壁 （單層鱗狀上皮）的接口，內皮細胞是沿著整個循環系統，由心臟直至最小的微血管；血管內 皮細胞最為重要的一個功能就是參與血管的形成，而在眾多心血管疾病、糖尿病及其他原 因引起的血管器質性病變中，很多情況下都是由于血管內皮細胞凋亡、壞死或是不再增殖 引起的，因此血管內皮細胞就成為了現在很多研究的熱點，這些研究以及實驗往往需要用 到大量的血管內皮細胞；現有技術中，采用M199基礎培養基和10％胎牛血清作為培養基培 養內皮細胞，其大血管內皮細胞的生長活性不夠，且容易受到雜細胞的污染。

發明內容

（一）要解決的技術問題

為解決上述問題，本發明提出了一種內皮培養體系，能夠在2%血清的環境下促進大血 管內皮細胞的生長活性，也可以部分抑制成纖維和平滑肌細胞的活性，減少雜細胞的污染。

（二）技術方案

本發明的內皮培養體系，包括內皮培養基和內皮添加劑；所述內皮培養基其組成成分 及濃度為：氯化鈉6800mg/L，氯化鉀400mg/L，氯化鈣200mg/L，硫酸鎂200mg/L，磷酸二氫鈉 140mg/L，L-精氨酸70mg/L，L-組氨酸20mg/L，L-賴氨酸70mg/L，DL-色氨酸20mg/L，DL-苯丙 氨酸50mg/L，DL-蛋氨酸30mg/L，DL-絲氨酸50mg/L，DL-蘇氨酸60mg/L，DL-亮氨酸120mg/L， DL-異亮氨酸40mg/L，DL-纈氨酸50mg/L，DL-谷氨酸150mg/L，DL-天冬氨酸60mg/L，DL-α-丙 氨酸50mg/L，L-脯氨酸40mg/L，L-羥脯氨酸10mg/L，甘氨酸50mg/L，乙酸鈉83mg/L，酚紅 15mg/L，L-酪氨酸40mg/L，L-胱氨酸20mg/L，煙酸（維生素B3）0.025mg/L，煙酰胺0.025mg/L， 鹽酸吡哆辛0.025mg/L，鹽酸吡哆醛0.025mg/L，維生素B10.01mg/L，核黃素（維生素B2） 0.01mg/L，泛酸鈣0.01mg/L，內消旋肌醇0.05mg/L，對氨基苯酸0.05mg/L，氯化膽堿0.5mg/ L，膽固醇0.2mg/L，維生素K3（甲萘醌）0.01mg/L，維生素D2（骨化醇）0.1mg/L，維生素A 0.1mg/L，吐溫805mg/L，L-鹽酸半胱氨酸0.1mg/L，還原型谷胱甘肽0.05mg/L，抗壞血酸（維 生素C）0.05mg/L，DL-α-鹽酸生育酚鈉0.01mg/L，葉酸（維生素B）0.01mg/L，D-生物素 0.01mg/L，葡萄糖3150mg/L，胸腺嘧啶0.37mg/L，次黃嘌呤2.4mg/L；

所述內皮添加劑其組成成分及濃度為：重組人表皮細胞生長因子5ng/ml，氫化可的松 10ng/ml，重組人血管內皮生長因子10ng/ml，重組人堿性成纖維生長因子5ng/ml，R³胰島素 樣生長因子15ng/ml，維生素C50ug/ml，肝素50ug/ml，重組人胰島素10ug/ml，人全鐵轉鐵 蛋白5ug/ml。

有益效果

與現有技術相比，本發明的內皮培養體系，能夠在5%血清的環境下促進大血管內皮細 胞的生長活性，也可以部分抑制成纖維和平滑肌細胞的活性，減少雜細胞的污染。

具體實施方式