[發明專利]一種調節啟動子強度和表達模式的特異DNA分子

有效

• 申請號: 201610113009.2
• 申請日: 2016-02-29
• 公開（公告）號: CN105647924B
• 公開（公告）日: 2019-03-19
• 發明（設計）人: 何秀萍;劉莎;郭雪娜;王肇悅
• 申請（專利權）人: 中國科學院微生物研究所
• 主分類號: C12N15/113
• 分類號: C12N15/113;C12N15/63
• 代理公司: 北京紀凱知識產權代理有限公司 11245
• 代理人: 關暢;何葉喧

1.特異DNA分子甲為DNA分子Ⅰ；

所述DNA分子Ⅰ自上游至下游依次包括：RREP區段、PCA區段、UASGal4pBS區段和GAL1p△m2區段；

所述RREP區段為順式調控元件RRPE；所述PCA區段為順式調控元件PAC；所述UASGal4pBS區段為酵母轉錄因子Gal4結合位點的序列；所述GAL1p△m2區段為敲除GAL1p啟動子中的兩個阻遏蛋白結合序列的序列；

所述RREP區段為序列表中序列6自5’末端起第4至12位所示的DNA序列；

所述PCA區段為序列表中序列6自5’末端起第19至27位所示的DNA序列；

所述UASGal4pBS區段為序列表中序列6自5’末端起第31至208位所示的DNA序列；

所述GAL1p△m2區段為序列表中序列6自5’末端起第215至660位所示的DNA序列；

所述DNA分子Ⅰ為序列表中序列6所示的DNA分子。

2.特異DNA分子乙，自上游至下游依次包括：權利要求1所述特異DNA分子甲和ADH1t區段；

所述ADH1t區段為序列表中序列1所示的DNA分子。

3.含有權利要求1所述特異DNA分子甲的重組質粒甲。

4.含有權利要求2所述特異DNA分子乙的重組質粒乙。

5.權利要求1所述特異DNA分子甲、權利要求2所述特異DNA分子乙、權利要求3所述重組質粒甲或權利要求4所述重組質粒乙在啟動目的基因表達中的應用。

6.一種表達目的基因的方法，包括如下步驟：采用權利要求1所述特異DNA分子甲啟動目的基因的表達。

7.一種表達目的基因的方法，包括如下步驟：將目的基因插入權利要求3所述重組質粒甲中的所述特異DNA分子甲的下游，由所述特異DNA分子甲啟動所述目的基因的表達。

8.A1）或A2）：

A1）一種表達目的基因的方法，包括如下步驟：將目的基因插入權利要求2所述特異DNA分子乙中的所述特異DNA分子甲和所述ADH1t區段之間，由所述特異DNA分子甲啟動所述目的基因的表達；

A2）一種表達目的基因的方法，包括如下步驟：將目的基因插入權利要求4所述重組質粒乙中的所述特異DNA分子甲和所述ADH1t區段之間，由所述特異DNA分子甲啟動所述目的基因的表達。