[發明專利]一種磷霉素降解菌篩選及其菌劑制備方法和該菌劑的應用

在審

• 申請號: 201610109635.4
• 申請日: 2016-02-29
• 公開（公告）號: CN105695386A
• 公開（公告）日: 2016-06-22
• 發明（設計）人: 曾萍;宋永會;謝曉琳;劉峰;王遠航;廖苗
• 申請（專利權）人: 中國環境科學研究院;東北制藥集團股份有限公司
• 主分類號: C12N1/36
• 分類號: C12N1/36;C12N1/02;C02F3/34
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種磷霉素抗生素降解菌的篩選方法，其特征在于所述方法中使用的富集培養基、 篩選培養基和馴化培養基是除了營養元索，以磷霉素作為唯一碳源的培養基。

2.根據權利要求1所述的一種磷霉索抗生索降解菌的篩選方法，其特征在于所述含磷 霉索的培養液中磷霉素的濃度為100-200ppm，其余為營養元素和水。

3.根據權利要求1所述的一種磷霉素抗生素降解菌的篩選方法，其特征在于所述營養 元索的成份和濃度如下：(NH₄)₂SO₄1000-1200mg/L，KH₂PO₄800-1000mg/L，K₂HPO₄200-300mg/ L，MgSO₄·7H₂O500-600mg/L，FeSO₄10-20mg/L，CaCl₂50-70mg/L.使用時稀釋25-50倍左右。

4.根據權利要求1所述的一種磷霉索抗生索降解菌的篩選方法，其特征在于具體步驟 為：

1)菌源的采集

以處理含有磷霉素抗生素制藥廢水污水處理廠的活性污泥為磷霉素降解土著菌的菌 源.

2)馴化

取自污水處理廠的活性污泥，先空曝2d后靜置12h，排出上清液，加入體積3L的反應器 中，溫度控制在25-30℃，pH控制在6.5-7.5左右，設置轉速為150-200r/min，以磷霉素鈉作 為唯一碳源，對活性污泥進行馴化.

3)菌種的純化

a)取馴化后的活性污泥的上清液，按照不同稀釋倍數涂布到篩選培養基平板上，35℃ 恒溫培養48h；

b)重復上述步驟，直至得到形態單一的純化菌落；

c)純化后的菌落按種于菌種保藏培養基斜面上，35℃恒溫培養48h后，保存于-20℃冰 箱。

5.根據權利要求4所述的一種磷霉素抗生索降解菌的篩選方法，其特征在于：所述篩選 培養基為：無機鹽營養液和磷霉素鈉和營養鹽、微量元索制備.

其中無機營養液由以下營養元素組成：

營養液；(NH₄)₂SO₄1000mg/L，KH₂PO₄800mg/L，K₂HPO₄200mg/L，MgSO₄·7H₂O500mg/L， FeSO₄10mg/L，CaCl₂50mg/L；

微量元索：NiSO₄32mg/L，Na₂BO₇·H₂O7.2mg/L，(NH₄)₆Mo₇O24·H₂O14.4mg/L， ZnCl₂23mg/L，CoCl₂·H₂O21mg/L，CuCl₂·2H₂O10mg/L，MnCl₂·4H₂O30mg/L.每升培養基加 50ml無機營養液、50ml微量元素、15g瓊脂，121℃滅菌30min，冷卻后加入200mg/L磷霉素.

所述菌種保藏培養基為：

胰蛋白胨10g、酵母提取物5g、氯化鈉10g、950ml純水、15g瓊脂.pH＝7.0-7.2，121℃滅 菌30min。

6.一種磷霉索抗生索降解菌，其特征在于由權利要求1-5所述方法制備得到。

7.一種磷霉素抗生索降解菌菌劑，其特征在于：由權利要求6所述方法制備。