[發明專利]一種齒瓣石斛種子和共生真菌混合播種的育苗方法

有效

• 申請號: 201610108301.5
• 申請日: 2016-02-26
• 公開（公告）號: CN105815002B
• 公開（公告）日: 2018-03-27
• 發明（設計）人: 邵士成;高江云;黃暉;劉強
• 申請（專利權）人: 中國科學院西雙版納熱帶植物園
• 主分類號: A01C1/02
• 分類號: A01C1/02;A01C1/04;A01G18/00;A01G22/00;C05F11/00
• 代理公司: 昆明協立知識產權代理事務所(普通合伙)53108
• 代理人: 謝嘉,旃習涵

1.一種齒瓣石斛種子和共生真菌混合播種的育苗方法，包括以下步驟：

(1)采集野外自然結實并成熟但果莢尚未開裂的齒瓣石斛種子保存備用；

(2)真菌粉的制作：

2.1培養基的制作：以錐形瓶10％體積的量將PDA液體培養基裝瓶，封口后裝入滅菌鍋，于121℃，115KPa條件下滅菌20min，備用；

2.2將活化培養3～10天的保藏編號為CGMCC No.9551的膠膜菌屬(Tulasnella sp.)真菌接種于備用的PDA液體培養基，于23～28℃，120～200rpm條件下發酵培養5～10天；

2.3用紗布過濾發酵液獲取菌絲體，用無菌水沖洗菌絲體3～5次并瀝水以去除殘留的葡萄糖，將菌絲體和1～20倍質量的瓊脂放入勻漿機打碎成粉；

2.4將打碎好的粉末置于烘箱內25～35℃條件下烘干0.5～4小時，獲得真菌粉；

(3)混合播種包的制作

3.1取一個齒瓣石斛果莢中10％～100％的種子與1kg真菌粉混勻后，分裝入紙袋，每個紙袋內裝0.1～0.5g的種子真菌粉混合物；

3.2在每個紙袋內再裝入普通干苔蘚碎片0.1～2.0g混勻，得到混合播種包；

4、茶樹林播種

4.1先將混合播種包用清水浸泡至吸水飽和，然后放置在離地高10cm以上的茶樹樹干上，并用普通保鮮膜松散的纏繞1～3圈；每個播種點放置1～8個混合播種包；

4.2用針刺穿保鮮膜和混合播種包表面形成均勻的小孔，使混合播種包中的種子在萌發過程中和外界保持相通；

4.3播種30天時可見種子陸續發育成原球莖，45～50天時多數原球莖發育成幼苗，此時應在有幼苗處開孔放苗。

2.根據權利要求1所述的育苗方法，其特征在于：步驟2.2中，發酵培養條件優選28℃，150rpm，7天。

3.根據權利要求1所述的育苗方法，其特征在于：步驟2.3中，將菌絲體和5倍質量的瓊脂放入勻漿機打碎成粉。

4.根據權利要求1所述的育苗方法，其特征在于：步驟2.4中，優選30℃條件下烘干2小時。

5.根據權利要求1所述的育苗方法，其特征在于：步驟3.1中，取一個齒瓣石斛果莢中30％～40％的種子與1kg真菌粉混勻。

6.根據權利要求1所述的育苗方法，其特征在于：步驟3.1中，每個紙袋內裝0.2g的種子真菌粉混合物。

7.根據權利要求1所述的育苗方法，其特征在于：步驟3.2中，將普通干苔蘚剪成0.2～2.0cm長短的碎片；每個紙袋內裝入0.3～0.6g的普通干苔蘚碎片。

8.根據權利要求1所述的育苗方法，其特征在于：步驟4.1中，每個播種點放置4～6個混合播種包；用保鮮膜松散纏繞2圈。

9.根據權利要求1所述的育苗方法，其特征在于：步驟4.2中，每個混合播種包扎2～6個小孔，孔間距1cm。

10.根據權利要求1所述的育苗方法，其特征在于：步驟4.3中，所述的開孔放苗其孔徑優選為0.25～4cm²。