[發明專利]原阿片堿作為特征識別物在鑒別蜂蜜中是否含有博落回蜂蜜中的應用

在審

• 申請號: 201610104784.1
• 申請日: 2016-02-25
• 公開（公告）號: CN105738518A
• 公開（公告）日: 2016-07-06
• 發明（設計）人: 薛曉鋒;吳黎明;曹葳蕤;杜冰;張中印;趙柳微;王妙;韓麗妲
• 申請（專利權）人: 中國農業科學院蜜蜂研究所
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06
• 代理公司: 北京路浩知識產權代理有限公司 11002
• 代理人: 郝瑞剛

1.原阿片堿作為特征識別物在鑒別蜂蜜中是否含有博落回蜂蜜中的應用。

2.以原阿片堿作為特征識別物，采用LC-Q-TOF或LC/MS/MS檢測蜂蜜中是否含有博落回蜂蜜的方法。

3.根據權利要求2所述的方法，其特征在于：所述LC-Q-TOF的飛行時間質譜圖中至少含有354.1366±5ppm質量數(M+H)準分子離子峰；

優選地，所述飛行時間質譜圖中還含有如下質量數(M+H)準分子離子峰中的一個或多個：336.0887±5ppm，332.1090±5ppm，370.1670±5ppm，370.1683±5ppm；更優選地，所述飛行時間質譜圖中同時含有上述4個準分子離子峰。

4.根據權利要求2或3所述的方法，其特征在于，檢測前，采用如下方法對所述蜂蜜樣品進行預處理：取蜂蜜樣品，每1g蜂蜜中加入0.8-1.2mL水溶解，向溶解液中加入0％-0.3％的甲酸乙腈溶液或甲酸甲醇溶液斡旋提取1-8min，加入無水硫酸鎂和氯化鈉后離心，取有機相并用氮氣吹干，然后加入40％-60％的乙腈水溶液或甲醇水溶液復溶，過濾即得。

5.根據權利要求4所述的方法，其特征在于：取蜂蜜樣品，每1g蜂蜜中加入1mL水溶解，向溶解液中加入0％-0.2％的甲酸乙腈溶液或甲酸甲醇溶液斡旋提取5min，加入無水硫酸鎂和氯化鈉后離心，取有機相并用氮氣吹干，然后加入50％的乙腈水溶液或甲醇水溶液復溶，過濾即得。

6.根據權利要求2或3或5所述的方法，其特征在于，所述LC-Q-TOF中的LC包括如下檢測條件：

色譜柱：C18柱或C8柱或苯基柱，優選為C18柱，進一步優選為EclipsePlusC18，2.1x100mm，1.8μm；

流動相：A乙腈或甲醇，B0％-0.2％的甲酸水溶液，梯度洗脫：0-2min5％B，2-20min90％B，20-21min5％B，21-35min5％B；

所述Q-TOF包括如下檢測條件：

目標離子：354.1366；

碰撞能量30eV。

7.根據權利要求6所述的方法，其特征在于：所述LC還包括如下檢測條件：流速：0.15-0.6mL/min，柱溫：25-35℃，進樣量：1-30μL；

優選為：流速：0.2mL/min，柱溫：30℃，進樣量：2μL；

和/或：所述Q-TOF還包括如下檢測條件：

ESI正離子，干燥氣氮氣流速：5-7mL/min，溫度280-320℃，氣簾氣流速：9-11L/min，溫度330-370℃，電力電壓3800-4200V；

MSscan全掃描，質量數范圍100-2000，參比實時校正；

優選為：ESI正離子，干燥氣氮氣流速：6mL/min，溫度300℃，氣簾氣流速：10L/min，溫度350℃，電離電壓4000V；

MSscan全掃描，質量數范圍100-2000，參比實時校正。

8.根據權利要求2或3或5所述的方法，其特征在于，所述LC/MS/MS中的LC包括如下條件：

色譜柱：C18柱或C8柱或苯基柱，優選為C18柱，進一步優選為agilentSBC18，2.1x50mm，1.8μm；

流動相：A乙腈或甲醇，B0％-0.2％的甲酸水溶液，梯度洗脫，0-1min5％B，1-4min20％B，4-6min90％B，6-8min5％B；

MS/MS包括如下條件：

掃描方式：MRM，原阿片堿354>189，354>275；倍增電壓：0-400。

9.根據權利要求8所述的方法，其特征在于，所述LC還包括：流速：0.15-0.6mL/min，柱溫：25-35℃，進樣量1-30μL；

優選為：流速：0.2mL/min，柱溫：30℃，進樣量2μL。

所述MS/MS還包括：ESI正離子，干燥氣氮氣流速：5-7mL/min，溫度180-220℃，氣簾氣流速：9-11L/min，溫度330-370℃，電離電壓3800-4200V；

優選為：ESI正離子，干燥氣氮氣流速：6mL/min，溫度300℃，氣簾氣流速：10L/min，溫度350℃，電離電壓4000V。

10.根據權利要求2-9任一所述的方法，其特征在于：LC-Q-TOF的檢出限為2-3μg/kg，LC/MS/MS的檢出限為0.5-1μg/kg。