[發明專利]一種測定曲格列汀片中有關物質的方法

有效

• 申請號: 201610101821.3
• 申請日: 2016-02-24
• 公開（公告）號: CN105738517B
• 公開（公告）日: 2016-11-09
• 發明（設計）人: 杜志博;王鶴然;陳嘉智;邵詩雅;徐小林;彭韙
• 申請（專利權）人: 中山萬漢醫藥科技有限公司
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02
• 代理公司: 北京精金石專利代理事務所(普通合伙) 11470
• 代理人: 劉曄

技術領域

本發明涉及分析化學領域，具體涉及一種測定曲格列汀片中有關物質的方法。

背景技術

在抗糖尿病藥物中，口服給藥的小分子化合物DPP-IV抑制劑研究最為活躍。DPP-IV是體內的一種酶，能夠引發腸促胰島素，即胰葡萄糖素樣肽-1和葡萄糖依賴性促胰島素多肽的失活，而這2種腸降胰島素在血糖調節中發揮著重要作用。抑制DPP-IV能夠增加血糖水平依賴性胰島素分泌，從而控制血糖水平。

DPP-IV抑制劑類藥物被命名為“列汀類”，此類藥物共有17個，其中的曲格列汀由武田制藥開發，于2014年首次在日本獲批上市，是一種超長效的DPP-IV抑制劑，每周只需要口服一次，可產生持續的DPP-IV抑制作用，不僅降糖效果理想，同時具有不增加體重和不會引起低血糖反應等優越性。曲格列汀(Trelagliptin)化學名稱為：2-[6-3-氨基-哌啶-1-基]-3-甲基-2，4-二氧代-3，4-二氫-2H-嘧啶-1-基甲基]-4-氟-芐腈。其化學結構式如下：

曲格列汀中的雜質主要有以下三個來源：一是本品原料合成過程中帶入的起始原料、中間體和降解產物；二是原料合成反應中生成的副產物；三是產品在貯藏期間由于環境的影響會產生降解雜質。這些雜質會影響到藥品的純度和質量，需要建立有關物質的分析方法來控制這些雜質的含量。各雜質的名稱和化學結構式如下。其中雜質V、Q、W、L、A與O為工藝雜質；雜質R和P為降解雜質，R在堿性條件和氧化條件下易生成，P在酸性條件下易生成。

中國專利申請(申請公布號CN104237421A)提供一種琥珀酸曲格列汀及其制劑的有關物質檢測方法，采用二極管陣列檢測器，該方法采用的色譜柱為十八烷基硅烷鍵合硅膠色譜柱，流動相A為磷酸鹽緩沖液，流動相B為乙腈，且所述的磷酸鹽緩沖液與乙腈的體積比為60∶40～85∶15，磷酸鹽緩沖液的pH值為5.0～5.5，磷酸鹽緩沖液的濃度為0.05～0.1mol/L，檢測波長為278nm。其分析方法中水相組成復雜，包括緩沖鹽和三乙胺，這些添加劑的加入會給分析方法帶來較多不良的影響：不僅使色譜系統平衡較慢，同時也會對色譜柱的壽命帶來影響；經過試驗，發現有機相濃度需要達到至少60％乙腈才能將本品中所有雜質洗脫完全，但此專利公開的方法有機相濃度僅為40％。該專利采用278nm作為檢測波長，經過實驗發現，在此波長下雜質P沒有任何紫外吸收。這些方面均表明，此前公開的分析方法不可能完全控制本品的質量。

發明內容

針對上述技術問題，本發明提供一種測定曲格列汀片中有關物質的方法，所述方法采用高效液相色譜法，將樣品溶液注入高效液相色譜儀，完成曲格列汀片劑中有關物質的測定，色譜條件為：

色譜柱：以表面帶電雜化顆粒的硅膠為填料的色譜柱；

流動相：流動相A為酸性水溶液，流動相B為有機溶劑，流動相A的體積百分比與流動相B的體積百分比的和始終保持為100％，進行線性梯度洗脫。色譜柱優選waters公司Xselect系列C18柱。

表面帶電雜化顆粒可以提高低離子強度流動相條件下樣品的載量和峰容量，Xselect系列色譜柱可為酸性、堿性和中性化合物提供很好的選擇性。

進一步地，所述線性梯度如下：流動相B的起始比例為體積比3～5％，13min時升至體積比21～25％，20～24min時升至體積比70～80％。其中，起始比例優選體積比為3％、13min時優選體積比為21％、24min時優選體積比為80％。在24min后還可以添加一個過渡梯度，所述過渡梯度可以使流動相比例恢復至起始比例并沖洗至基線平穩。

進一步地，所述酸性水溶液中包含的酸為三氟乙酸、磷酸或高氯酸，酸性水溶液的pH值為1.5～4.0。其中包含的酸優選為磷酸。酸性水溶液的pH值優選為1.5～3.0，更優選2.0。

進一步地，所述有機溶劑為甲醇、乙腈、乙醇、四氫呋喃中的一種或者兩種以上混合物。優選為甲醇或乙腈，最優選為乙腈。

進一步地，所述流動相的流速為1.0mL/min～1.5ml/min。優選為1.2mL/min。

進一步地，所述色譜柱的溫度為25℃～40℃。優選為35℃。

進一步地，所述方法還包括檢測波長，所述檢測波長為220nm～230nm。優選為224nm。

進一步地，所述方法還包括進樣量，所述進樣量為10μL～50μL。