[發明專利]焦磷酸測序法檢測ABCC10基因試劑盒及方法

在審

• 申請號: 201610099084.8
• 申請日: 2016-02-23
• 公開（公告）號: CN105671155A
• 公開（公告）日: 2016-06-15
• 發明（設計）人: 曾柳;李智;張麗軍;周宏灝
• 申請（專利權）人: 李智
• 主分類號: C12Q1/68
• 分類號: C12Q1/68
• 代理公司: 長沙正奇專利事務所有限責任公司 43113
• 代理人: 盧宏;周棟

1.一種焦磷酸測序法檢測ABCC10基因多態性的試劑盒，其特征在于，所述試劑盒包括如下引物：

(1)擴增引物：

ABCC10的rs9349256上游引物：5′-CCTGTTCACCTCCTGTTCTGAGTT-3′；

ABCC10的rs9349256下游引物：5′-AATGTGGTGGAGGCAATTCA-3′；

其中，下游引物的5′進行生物素標記；

(2)測序引物：

ABCC10的rs9349256測序引物：5′-TTCACTCTCTCCTGACC-3′。

2.一種應用權利要求1所述的試劑盒檢測ABCC10基因多態性的方法，包括如下步驟：

(1)DNA提取；

(2)聚合酶鏈反應

配制50μlPCR擴增體系，包含：10×PCRbuffer5.0μl，dNTP1.5μl，ABCC10-上游引物0.5μl，ABCC10下游引物0.5μl，rTaq0.5μl，水40μl，模板2μl；按照下面的循環參數設置擴增儀：95℃5min預變性；然后依次在95℃30S,55℃30S,72℃30S,進行36個循環；再在72℃保持3min，最終保持在4℃，得擴增產物；

(3)焦磷酸測序單鏈樣本純化；

(4)焦磷酸測序；

(5)焦磷酸測序結果分析。