[發明專利]一種新城疫雞胚接種疫苗的制備方法及應用

在審

• 申請號: 201610098726.2
• 申請日: 2016-02-23
• 公開（公告）號: CN105749271A
• 公開（公告）日: 2016-07-13
• 發明（設計）人: 王紅琳;溫國元;邵華斌;羅青平;汪宏才;羅玲;張蓉蓉;張騰飛;艾地云;盧琴
• 申請（專利權）人: 湖北省農業科學院畜牧獸醫研究所
• 主分類號: A61K39/17
• 分類號: A61K39/17;A61P31/14
• 代理公司: 北京金智普華知識產權代理有限公司 11401
• 代理人: 巴曉艷

1.一種雞胚接種疫苗的制備方法，其特征在于，包括以下步驟：步驟1：接種：將新城疫病毒TS09-C株生產用毒種進行適當稀釋，接種發育良好的9～10日齡SPF雞胚，每胚尿囊腔內接種0.1ml，接種后密封針孔，置36～37℃繼續孵育，不必翻蛋；

步驟2：孵育和觀察：雞胚接種后，每日照蛋1次，將在48小時前死亡的雞胚棄去，48小時后，每4～8小時照蛋一次，死亡的雞胚隨時取出，直到96或120小時，不論死亡與否，全部取出，氣室向上直立，置于2～8℃冷卻；

步驟3：收獲：將冷卻4～24小時的雞胚取出，用碘酊消毒氣室部位，然后以無菌手術剝除氣室部卵殼，揭去卵殼膜，剪破絨毛尿囊膜及羊膜，勿使卵黃破裂，吸取雞胚液，每若干個雞胚的胚液混合為一組，收獲后的胚液置于滅菌瓶中，加入抗生素，在2～8℃冷庫處理4小時以上，留樣后，結凍保存，在收獲胚液的同時，應逐個檢查雞胚，如胎兒腐敗、胚液混濁及有任何污染可疑者棄去不用；

步驟4：疫苗配制：將無菌檢驗、病毒含量測定合格的若干組雞胚液濾過，混合于同一無菌容器內，按規定羽份，加入7％蔗糖、16％脫脂牛奶作穩定劑，同時加入抗生素充分搖勻，定量分裝，每羽份病毒含量應不低于10^3.0EID₅₀，分裝后迅速進行冷凍真空干燥；

步驟5：疫苗檢驗：主要包括物理性狀、無菌檢驗、支原體檢驗、外源病毒檢驗、鑒別檢驗、安全檢驗和效力檢驗。

2.根據權利要求1中所述的雞胚接種疫苗的制備方法，其特征在于，步驟1中將新城疫病毒TS09-C株稀釋至10^－3或10^－4。

3.根據權利要求1中所述的雞胚接種疫苗的制備方法，其特征在于，步驟3中抗生素的用量為1000u/ml。

4.根據權利要求1中所述的雞胚接種疫苗的制備方法，其特征在于，步驟4中抗生素的用量為1000u/ml。

5.一種權利要求1所述雞胚接種疫苗在預防雞新城疫中的應用。