[發明專利]一種針對人EDIL3基因的siRNA及其應用

有效

• 申請號: 201610096846.9
• 申請日: 2016-02-22
• 公開（公告）號: CN105624159B
• 公開（公告）日: 2019-02-05
• 發明（設計）人: 沈瑋;仲明;秦海峰;吳晉暉;徐慶強;宋洪元;張睿
• 申請（專利權）人: 中國人民解放軍第二軍醫大學
• 主分類號: C12N15/113
• 分類號: C12N15/113;C12N15/63;A61K31/713;A61K48/00;A61P27/02;A61P9/10;A61P35/00
• 代理公司: 上海元一成知識產權代理事務所(普通合伙) 31268
• 代理人: 趙青

本發明涉及基因工程技術領域，具體是一種特異性抑制人EDIL3的干擾序列，正義鏈如SEQ ID NO:1所示，反義鏈如SEQ ID NO:2所示。本發明還提供上述干擾序列在制備治療新生血管性疾病藥物中的應用。本發明的針對EDIL3基因表達的干擾序列，可以抑制臍靜脈血管內皮細胞的增殖、遷移、管樣形成，可以誘導細胞周期的阻滯；本發明干擾序列可以用于制備成穩定、有效、低毒的抑制EDIL3表達的、治療新生血管性疾病的生物靶向制劑或藥物。

技術領域

本發明涉及基因工程技術領域，具體地說，是一種特異性抑制EDIL3的小核酸干擾分子，以及在制備治療新生血管性疾病藥物中的應用。

背景技術

新生血管是一種在原有血管的基礎上生長出新血管的過程，其具有重要的生理及病理意義。新生兒的新生血管生成利于組織器官的生長，然而在成年后，大部分血管維持在靜止狀態；在病理性刺激下，血管內皮內皮細胞可以恢復增殖能力，進而促進新生血管形成。病理性新生血管的生成涉及到多種細胞因子的分泌及調節紊亂，并參與了多種疾病的發生發展，如腫瘤、糖尿病視網膜病變、類風濕性關節炎及肺動脈高壓等。在過去的十數年間，研究人員進行了大量研究探詢抑制新生血管的治療策略，以期預防和治療腫瘤、眼底和皮膚病變等。目前抗新生血管藥物，血管內皮生長因子單抗，已經應用于臨床治療新生血管性疾病。然而，由于血管內皮生長因子單抗發揮作用時效較短，需要多次治療，并且對增殖期糖尿病視網膜病變效果不佳。因此，尋求其它安全有效的治療手段，對治療新生血管性疾病具有重要的意義。

RNA干擾(RNA interference，RNAi)技術是近來發展日趨成熟的一門基因沉默技術，是內源性或外源性的雙鏈RNA在基因轉錄后水平上，介導細胞內信使RNA(mRNA)發生特異性降解，導致靶基因表達沉默，從而產生相應功能表型的缺失，是特異性抑制靶基因表達的過程，具有高效性、特異性的特點。在不影響正?；蚬δ艿那疤嵯?，RNA干擾可以抑制重要基因的表達，從而達到基因治療的目的，其對靶基因具有很好特異性及對目的基因抑制作用是其它藥物難以匹敵的。隨著RNA干擾技術的不斷完善，針對病理性新生血管的RNAi具有廣闊的應用前景。

表皮生長因子樣重復折疊1結構域蛋白3(EGF-like repeat and discoidin I-like domain-containing protein 3,EDIL3,also known as Del-1 and integrin-binding DEL1)是內皮細胞分泌分子量大小為52kDa的胞外基質相關糖蛋白。早期研究發現EDIL3在胚胎內皮細胞中短暫表達，并可以促進血管內皮細胞的粘附和遷移(Aoka Y,Johnson FL,Penta K,Hirata Ki K,Hidai C,Schatzman R,Varner JA,QuertermousT.The embryonic angiogenic factor Del1 accelerates tumor growth by enhancingvascular formation.Microvasc Res.2002 Jul；64(1):148-61)。近來研究發現，EDIL3在許多腫瘤中高表達，且與腫瘤預后密切相關(Sun JC,Liang XT,Pan K,Wang H,Zhao JJ,LiJJ,Ma HQ,Chen YB,Xia JC.High expression level of EDIL3 in HCC predicts poorprognosis of HCC patients.World J Gastroenterol.2010 Sep 28；16(36):4611-5.Watanabe T1,Kobunai T,Yamamoto Y,Ikeuchi H,Matsuda K,IshiharaS.et.al.Predicting ulcerative colitis-associated colorectal cancer usingreverse-transcription polymerase chain reaction analysis.Clin ColorectalCancer.2011 Jun；10(2):134-41)。這些研究表明EDIL3在血管形成及腫瘤發生發展過程中起著重要作用。