[發(fā)明專利]細(xì)胞膜微囊泡MVs和外泌體EXs的分離提取方法在審
| 申請(qǐng)?zhí)枺?/td> | 201610093446.2 | 申請(qǐng)日： | 2016-02-19 |
| 公開(kāi)（公告）號(hào)： | CN105716928A | 公開(kāi)（公告）日： | 2016-06-29 |
| 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人： | 陳顏芳;肖湘;王景菊;陳姬;柳華 | 申請(qǐng)（專利權(quán)）人： | 武漢大復(fù)生物科技有限公司 |
| 主分類號(hào)： | G01N1/34 | 分類號(hào)： | G01N1/34 |
| 代理公司： | 武漢開(kāi)元知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 42104 | 代理人： | 唐正玉 |
| 地址： | 430074 湖北省武漢市東湖高新區(qū)光谷大*** | 國(guó)省代碼： | 湖北;42 |
| 權(quán)利要求書(shū)： | 查看更多 | 說(shuō)明書(shū)： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 細(xì)胞膜 微囊泡 mvs 外泌體 exs 分離 提取 方法 | ||
1.細(xì)胞膜微囊泡MVs和外泌體EXs的分離提取方法，其特征在于按以下步驟進(jìn)行：
a、抽取外周血液樣品3-10ml置于抗凝管保存；用磷酸鹽緩沖生理鹽水(PBS)稀釋2－4倍，進(jìn)行離心得到上清液血漿；b:對(duì)上清液血漿再次進(jìn)行離心分離，沉淀物為MVs，c:對(duì)步驟b的上清液血漿進(jìn)行超速離心分離，沉淀物為EXs。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的細(xì)胞膜微囊泡MVs和外泌體EXs的分離提取方法，其特征在于：用磷酸鹽緩沖生理鹽水PBS稀釋3倍，混勻后用400r/s的轉(zhuǎn)速離心，35分鐘得到上清液血漿。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的細(xì)胞膜微囊泡MVs和外泌體EXs的分離提取方法，其特征在于：所述步驟b為：對(duì)上清液血漿再進(jìn)行兩次離心分離，第一次離心的轉(zhuǎn)速2000r/s，20分鐘，保存上清液進(jìn)行第二次離心，第二次離心的轉(zhuǎn)速20000r/s，120分鐘，沉淀物為MVs。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的細(xì)胞膜微囊泡MVs和外泌體EXs的分離提取方法，其特征在于：所述步驟c為：對(duì)得到沉淀物為MVs的上清液血漿再進(jìn)行離心分離，離心的轉(zhuǎn)速169000r/s，6小時(shí)，離心后沉淀物為EXs。
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