[發明專利]一種龍牙楤木芽多糖的制備方法

有效

• 申請號: 201610093072.4
• 申請日: 2016-02-21
• 公開（公告）號: CN105524186B
• 公開（公告）日: 2018-01-30
• 發明（設計）人: 張桂娟;吳舜;呂文博
• 申請（專利權）人: 張桂娟
• 主分類號: C08B37/00
• 分類號: C08B37/00
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術領域

本發明涉及一種多糖提取物的制備方法，尤其是涉及一種龍牙楤木芽多糖的制備方法。

背景技術

龍牙楤木（Aralia elata（Miq.）Seem.），又名遼東楤木、刺嫩芽，系五加科楤木屬植物，廣泛分布于我國黑龍江、吉林、遼寧等省市，野生資源豐富。可藥食兩用，根皮及莖皮入藥，食其嫩芽。龍牙楤木芽為進出口優質山野菜，每噸鹽漬品可達近4000元人民幣，為現代餐桌上難得的無污染純天然綠色食品。

隨著植物多糖增強免疫功能、抗輻射損傷、抗腫瘤等生物活性功能的研究，人們已成功的將多糖應用于保健品、藥品及化妝品行業的研究與開發之中。研究證實楤木多糖具有明確的抗輻射損傷、抗腫瘤、抗氧化等生物活性，這為研究龍牙楤木芽多糖及綜合利用龍牙楤木資源、開發相關副產品具有重大意義。目前，國內外對龍牙楤木芽的研究主要集中于皂苷類成分的提取、分離、純化、生物活性等研究方面，已證實其對人體有興奮、強壯作用，可用于急慢性炎癥及各種神經衰弱，而對其所含多糖類成分的研究卻只見于粗提含量較高，與根皮、莖皮中含量相似，未見將復合酶法運用于龍牙楤木芽多糖提取方面及利用大孔吸附樹脂進行脫色脫蛋白的相關報道，為了更好的充分利用龍牙楤木芽資源，提供一種高效、快速、簡便、易操作的制備方法，便于龍牙楤木芽多糖日后的精制與純化、結構鑒定、生物活性研究及應用于生產實際，成了目前丞待解決的重要問題。

發明內容

本發明的目的在于彌補現有技術的空白，提供一種以東北野生龍牙楤木芽為原料，高效、快速、簡便、易操作的龍牙楤木芽多糖的制備方法。

本發明是通過以下技術方案實現的：一種龍牙楤木芽多糖的制備方法，以龍牙楤木芽鮮品為原料，其特征在于按照以下步驟制備：

（1）將龍牙楤木芽鮮品凈選、切制成段，烘干（60～80℃），粉碎成粗粉備用；

（2）取粗粉，按1:15～1:25質量體積比加入石油醚常溫條件下超聲功率150～250W、脫脂30～90min，過濾，揮盡石油醚，得脫脂后粗粉；

（3）將脫脂后粗粉與水按1：25～1:35的質量體積比混合，再添加由纖維素酶、果膠酶、木瓜蛋白酶組成的復合酶，各酶添加量按脫脂后粗粉質量的0.5%～1.5%，于45～55℃水浴恒溫振蕩120～180min，過濾，得粗多糖提取液；

（4）將粗多糖提取液進行減壓濃縮，濃縮至一定體積，冷卻至室溫后，按體積比1:4加入95%乙醇，攪拌，4℃靜置12h，離心（6000r/min）得沉淀，沉淀用無水乙醇固化4～6h，再用丙酮、乙醚洗滌后低溫干燥；

（5）將干燥后沉淀加水復溶，配制成1mg/mL粗多糖溶液，按照1g處理好的ADS-7強極性吸附樹脂處理20～40mL粗多糖溶液，在50～70℃恒溫水浴振搖條件下靜態吸附15～45min，過濾，得脫色脫蛋白后的多糖溶液；

（6）將（5）所得多糖溶液進行減壓濃縮，濃縮至一定體積，按體積比1:4加入95%乙醇，攪拌，4℃靜置12h，離心（4000r/min）得沉淀，真空干燥得龍牙楤木芽多糖。

龍牙楤木芽為東北野生龍牙楤木春季新發的嫩芽。

所用溶劑水其pH值為6.5～7.5。

最佳技術方案為，步驟（3）中添加纖維素酶、果膠酶、木瓜蛋白酶組成的復合酶，酶添加量為脫脂后粗粉質量的1.5%～4.5%，其中纖維素酶-果膠酶-木瓜蛋白酶比例為2：3：1。

步驟（5）中采用ADS-7強極性大孔吸附樹脂進行脫色脫蛋白處理，1g樹脂處理30mg粗多糖，靜態吸附條件為恒溫水浴70℃條件下振搖30min。

本發明的優點及效果：

（1）本發明提供了從東北野生山野菜龍牙楤木芽中提取多糖的制備方法，為深入研究龍牙楤木芽多糖的組分分離、結構及組成、生物活性及應用研究提供支持。

（2）本發明在多糖提取過程加入纖維素酶、果膠酶、木瓜蛋白酶組成的復合酶，簡化了工藝過程，省略了提取前的浸泡過程；酶可以改變細胞壁的通透性，加快內容物的溶出，且可酶解糖蛋白使多糖成分最大限度的釋放出來，一次提取率高，減少提取次數，節約能耗，雜質溶出減少；提取條件溫和，降低多糖結構發生改變的幾率與保證了所提多糖的生物活性。