[發(fā)明專利]一種長鏈非編碼RNAuc.77及其應(yīng)用

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 201610088611.5
• 申請日: 2016-02-17
• 公開（公告）號: CN107090451A
• 公開（公告）日: 2017-08-25
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 孫昊;張勁松;康健;蔣雷;黃培培;陳旭鋒;錢文溢;陳俊杰
• 申請（專利權(quán)）人: 孫昊
• 主分類號: C12N15/113
• 分類號: C12N15/113;C12Q1/68
• 代理公司: 南京眾聯(lián)專利代理有限公司32206
• 代理人: 杜靜

1.一種人鼠同源性肺纖維化相關(guān)的長鏈非編碼RNA，其特征在于，其核苷酸序列如SEQ ID No.1所示，或與該序列90%以上同源的核苷酸序列，或該序列經(jīng)硫代修飾或/和甲氧基修飾得到的新的核苷酸序列。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的長鏈非編碼RNA用于制備診斷肺纖維化的診斷劑或試劑盒的用途。

3.一種權(quán)利要求1所述的長鏈非編碼RNA制備的用于診斷肺纖維化的試劑盒，其特征在于，包括：

1）用于擴(kuò)增權(quán)利要求1所述長鏈非編碼RNA的特異性引物對；

2）標(biāo)準(zhǔn)DNA模板或負(fù)載有權(quán)利要求1所述長鏈非編碼RNA的檢測芯片；

3）PCR反應(yīng)體系。

4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的試劑盒，其特征在于，所述特異性引物對包括上游引物和下游引物，上游引物序列為SEQ ID No.2，下游引物序列為SEQ ID No.3。

5.根據(jù)權(quán)利要求3所述的試劑盒，其特征在于，所述PCR反應(yīng)體系包括dNTP、PCR緩沖液和DNA聚合酶。

6.根據(jù)權(quán)利要求3所述的試劑盒，其特征在于，所述PCR反應(yīng)體系為熒光定量PCR反應(yīng)液，包含熒光染料。

7.權(quán)利要求3-6任一項(xiàng)所述的試劑盒的使用方法，其特征在于，10μmol/L上游引物1.0μL，10μmol/L下游引物1.0μL，肺組織/血液樣本cDNA 0.3μL，5U/μL DNA 聚合酶0.2μL，ddH2O 19μL；反應(yīng)參數(shù)均為：預(yù)變性94℃ 3min；變性94℃ 30sec，復(fù)性64℃ 30sec，延伸72℃ 60sec，所述變性- 復(fù)性- 延伸30 次循環(huán)。

8.一種檢測權(quán)利要求1所述長鏈非編碼RNA的方法，其特征在于，包括如下步驟：

1）提取樣品總RNA；

2）制備樣品cDNA；

3）擴(kuò)增權(quán)利要求1所述的lncRNA-uc.77。

9.一種權(quán)利要求1所述的長鏈非編碼RNA檢測肺纖維化的方法，其特征在于，包括如下步驟：

1）提取樣品總RNA；

2）制備樣品cDNA；

3）定量擴(kuò)增權(quán)利要求1所述的lncRNA-uc.77，并根據(jù)定量結(jié)果進(jìn)行判斷。

10.權(quán)利要求1所述的lncRNA-uc.77作為肺纖維化藥物新靶點(diǎn)的用途。