[發明專利]一種胃癌基因工程疫苗及其制備方法

無效

• 申請號: 201610087656.0
• 申請日: 2016-02-16
• 公開（公告）號: CN105727282A
• 公開（公告）日: 2016-07-06
• 發明（設計）人: 趙順英
• 申請（專利權）人: 趙順英
• 主分類號: A61K39/39
• 分類號: A61K39/39;A61K39/00;A61K38/19;A61P35/00;C12N15/27;C12N15/86
• 代理公司: 長沙星耀專利事務所 43205
• 代理人: 許伯嚴

1.一種胃癌基因工程疫苗，其特征在于，包括GM-CSF基因修飾的人胃癌細胞和佐劑；

所述GM-CSF基因修飾的人胃癌細胞通過如下步驟制備：

步驟S1，用含GM-CSF基因的重組仙臺病毒上清液感染人胃癌細胞，得到GM-CSF基因修飾的人胃癌細胞；

步驟S2，對步驟S1得到的GM-CSF基因修飾的人胃癌細胞滅活并進行熱休克處理；

所述佐劑通過如下步驟制備：

步驟S1，取對數生長期的人胃癌細胞接種于含體積百分比10％FBS的RPMI1640細胞培養液中，加入15～25μmol/mL的如下結構式的化合物(Ⅰ)培養36～48h得細胞培養液，

步驟S2，將細胞培養液離心棄上清液，沉淀懸浮于生理鹽水中，再放入液氮中冷凍5～10分鐘，再將冷凍物取出，放入37℃溫水融化，如此反復凍融3～5次，即可得所述佐劑。

2.根據權利要求1所述的胃癌基因工程疫苗，其特征在于，所述佐劑通過如下步驟制備：步驟S1，取對數生長期的人胃癌細胞5×10⁷個接種于1ml含體積百分比10％FBS的RPMI1640細胞培養液中，加入20μmol/mL的所述化合物(Ⅰ)培養42h得細胞培養液；步驟S2，將細胞培養液離心棄上清液，沉淀懸浮于1ml生理鹽水中，再放入液氮中冷凍5～10分鐘，再將冷凍物取出，放入37℃溫水融化，如此反復凍融3～5次，即可得所述佐劑。

3.根據權利要求1或2所述的胃癌基因工程疫苗，其特征在于：所述人胃癌細胞為SGC-7901人胃癌細胞系。

4.根據權利要求1或2所述的胃癌基因工程疫苗，其特征在于：所述滅活方法為采用⁶⁰Co照射滅活。

5.根據權利要求1或2所述的胃癌基因工程疫苗，其特征在于，所述熱休克處理方法為：將人胃癌細胞置于42℃～65℃條件下溫浴0.5h～2h。

6.權利要求1所述的胃癌基因工程疫苗在制備預防或治療胃癌的藥物中的應用。