[發明專利]抗羊痘病毒K3L蛋白C末端的單克隆抗體及其應用

有效

• 申請號: 201610087201.9
• 申請日: 2016-02-16
• 公開（公告）號: CN105754952B
• 公開（公告）日: 2020-07-10
• 發明（設計）人: 趙志荀;張強;朱學亮;張志東;吳國華;顏新敏;李健;朱海霞;吳娜
• 申請（專利權）人: 中國農業科學院蘭州獸醫研究所
• 主分類號: C12N5/20
• 分類號: C12N5/20;C07K16/08;G01N33/577;G01N33/569;C12R1/91
• 代理公司: 蘭州振華專利代理有限責任公司 62102
• 代理人: 張晉

本發明公開一株可分泌抗羊痘病毒K3L蛋白C末端的單克隆抗體的雜交瘤細胞株、其分泌的抗羊痘病毒K3L全蛋白的單克隆抗體，以及該雜交瘤細胞株和抗體的應用。本發明的可分泌抗羊痘病毒K3L蛋白C末端單克隆抗體的雜交瘤細胞株K3L35在中國典型培養物保藏中心保藏編號為：CCTCC NO：C2015223。由所述的K3L35雜交瘤細胞株可分泌K3L蛋白C末端單克隆抗體。本發明的K3L35雜交瘤細胞株及所分泌的單克隆抗體可在制備診斷或檢測羊痘病毒感染試劑中的應用，也可在制備試驗用試劑中的應用。

技術領域

本發明涉及一株單克隆抗體及應用，確切講涉及一種可分泌抗羊痘病毒K3L蛋白C末端的單克隆抗體的雜交瘤細胞株、其分泌的抗羊痘病毒K3L蛋白的C末端單克隆抗體，以及該雜交瘤細胞株和抗體的應用。

背景技術

羊痘是羊疫病中一種高度接觸性和具有毀滅性病毒病，被世界動物衛生組織（OIE）列為法定報告的動物疫病，以發熱、結膜炎、鼻炎、皮膚和粘膜的痘瘡、呼吸困難及死亡為特征。羊痘主要流行于非洲、中東、印度、尼泊爾土耳其的一些地區，國內主要流行于青海、甘肅、湖南和內蒙等地區。羊痘病毒（Sheeppox virus, SPV）屬于痘病毒科、脊索動物痘病毒亞科、山羊痘病毒屬，主要通過氣溶膠、近距離接觸或昆蟲叮咬傳播，綿羊是綿羊痘病毒主要的宿主，各年齡段均能感染，但是死亡病例主要發生于羔羊，死亡率高達100%，給養羊業造成重大的經濟損失，被認為是經濟上潛在的生物武器。因此，綿羊痘的診斷和防控一直是研究的熱點。

中國發明專利2011103869424公開了一種羊痘病毒屬病毒，包括山羊痘病毒、綿羊痘病毒及牛疙瘩皮膚病病毒的芯片檢測裝置。該專利通過設計特異性探針，可對羊痘病毒屬的山羊痘病毒、綿羊痘病毒及牛疙瘩皮膚病病毒進行同時鑒定。本發明旨在建立一種靈敏度高、特異性強、節時省力并且易于觀察結果的微陣列芯片檢測羊痘病毒屬山羊痘病毒、綿羊痘病毒及牛疙瘩皮膚病病毒的方法。

中國發明專利申請2013105940610和201310594930X分別公開了用于羊痘病毒膠體金檢測試劑條的膠體金、金標抗體及其制備方法。所述膠體金中采用羊痘病毒P32單克隆抗體的最適宜標記量，所制備金標抗體復合物在可見光范圍內進行掃描出現最大的吸收峰。

上述這些方法都是針對病毒復制中、后期的核酸或者結構蛋白而建立起來的，因此，它們只能在病毒感染宿主12h甚至更長的時間之后才能檢測出病毒是否存在。而本發明所制備的抗K3L蛋白的C末端單克隆抗體在羊痘病毒早期感染檢測中的應用，最早可在病毒感染細胞2小時檢測到K3L的表達，24小時達到最大。因此，本發明涉及到的K3L抗體的制備可在羊痘病毒早期檢測試劑或試劑盒中的應用。

發明內容

本發明提供一種可分泌抗羊痘病毒K3L蛋白C末端單克隆抗體的雜交瘤細胞株及其分泌的抗羊痘病毒K3L蛋白的單克隆抗體，同時提供其用途。

本發明的可分泌抗羊痘病毒K3L蛋白C末端單克隆抗體的雜交瘤細胞株K3L35已經于2015年12月17日在中國武漢市武漢大學的中國典型培養物保藏中心保藏，保藏編號為：CCTCC NO：C2015223。

由所述的K3L35雜交瘤細胞株可分泌K3L蛋白C末端單克隆抗體。

本發明的K3L35雜交瘤細胞株及所分泌的單克隆抗體可在制備診斷或檢測羊痘病毒感染試劑中的應用，也可在制備試驗用試劑中的應用。

本發明的抗K3L蛋白C末端的單克隆抗體制備方法如下：