[發明專利]復合微生物菌劑及其制備方法

在審

• 申請號: 201610086477.5
• 申請日: 2016-02-16
• 公開（公告）號: CN105567604A
• 公開（公告）日: 2016-05-11
• 發明（設計）人: 嚴榮飛;唐夕正;蔣忠良;徐慧;王楠;侯居峰;張榮
• 申請（專利權）人: 江蘇中通生物科技有限公司
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C12N1/14;C12N1/16;C12R1/72;C12R1/645;C12R1/38;C12R1/07;C12R1/265;C12R1/01;C12R1/20;C12R1/63;C12R1/085;C12R1/11;C12R1
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技術領域

本發明涉及一種復合微生物菌劑及其制備方法。

背景技術

目前，應用于污水處理和污染土壤修復的微生物菌劑的發酵方法己有多種專利和 文獻報道。環保微生物菌劑的發酵工藝大體上可分為固體發酵和液體發酵（從培養基形態 上）、單菌發酵和混菌發酵（從菌株數量上）等幾種類型。上述發酵技術存在如下一些缺點, 如：1)液體發酵對設備及其控制要求較高；2)單菌發酵效率低下；3)混菌發酵不易調控各菌 株比例等。

發明內容

針對現有問題，本發明公開了一種復合微生物菌劑及其制備方法。

本發明的技術方案如下：

一種復合微生物菌劑，所述微生物菌劑是由經過發酵的真菌菌劑和經過發酵的細菌菌 劑按照菌數比35-85:15-65的比例混合后形成。

優選的，其中，發酵前的所述真菌種類包括假絲酵母菌、白腐菌和褐腐菌；發酵前 的所述細菌種類包括假單胞菌、芽孢桿菌、微球菌、黃桿菌、不動桿菌、脫硫弧菌、臘狀芽孢 桿菌、巨大芽孢桿菌、屈撓桿菌、歐文氏菌、黃單胞菌、氣單胞菌、以及鄰單胞菌。

一種權利要求1中所述的復合微生物菌劑的制備方法，包括以下步驟：

A：制作細菌培養基和真菌培養基；所述細菌培養基由米糠、麩皮、玉米粉、大豆粉、醪 液蛋白、石灰粉和硫酸銨組成，它們的重量百分數范圍依次分別為35-60%、15-25%、5-10%、 3-10%、7-15%、2-5%、0.05-0.5%；所述真菌培養基由由米糠、麩皮、醪液蛋白、古龍酸母液 和硫酸銨組成，它們的重量百分數范圍依次分別為35-50%、15-35%、5-10%、5-20%、0.05- 0.5%；

B：細菌和真菌發酵前培養；

將各個細菌菌株分別依次作一組斜面培養、30-37℃條件下二級液體震蕩培養、30-37 ℃條件下三級液體震蕩培養，至每ml液體培養基中的菌數分別達到0.1-5.0×10⁸個；

將真菌分別依次作一組斜面培養、25-30℃條件下二級液體震蕩培養、25-30℃條件下 三級液體震蕩培養，至每ml液體培養基中的菌數分別達到0.1-5.0×10⁶個；

C：發酵；在細菌菌劑發酵時，先調節細菌培養基中的水份至40-50%、pH至6.5-7.5，121- 122度濕熱滅菌30-40分鐘，冷卻至室溫后，將各菌株純培養物按單一菌株的菌數范圍比5- 30%的比例進行攪拌混合，再以3-20%的接種量接種于細菌培養基，經3-10天的室溫下固態 發酵后獲得細菌菌劑。

在真菌菌劑發酵時，調節真菌培養基中的水份至40-50%、pH至4.5-6.5，121-122 度濕熱滅菌30-40分鐘，冷卻至室溫后，將各菌株純培養物在室溫下按單一菌株的菌數范圍 比20-50%的比例進行攪拌混合，再以5-25%的接種量接種于真菌培養基，經3-15天室溫下固 態發酵后獲得真菌菌劑。

D：將真菌菌劑和細菌菌劑按照菌數比35-85:15-65混合形成所述復合微生物菌 劑。

優選的，包括以下步驟：

A：制作細菌培養基和真菌培養基；所述細菌培養基由米糠、麩皮、玉米粉、大豆粉、醪 液蛋白、石灰粉和硫酸銨組成，它們的重量百分數范圍依次分別為40-50%、20-23%、7-9%、 5-8%、9-11%、2-5%、0.1-0.3%；所述真菌培養基由由米糠、麩皮、醪液蛋白、古龍酸母液和 硫酸銨組成，它們的重量百分數范圍依次分別為40-50%、20-30%、6-8%、11-17%、0.2-0.4%；

B：細菌和真菌發酵前培養；

將各個細菌菌株分別依次作一組斜面培養、30-37℃條件下二級液體震蕩培養、30-37 ℃條件下三級液體震蕩培養，至每ml液體培養基中的菌數分別達到3.0×10⁸個；

將真菌分別依次作一組斜面培養、25-30℃條件下二級液體震蕩培養、25-30℃條件下 三級液體震蕩培養，至每ml液體培養基中的菌數分別達到3.0×10⁶個；