[發明專利]馬鈴薯莖尖分化培養基及其制備方法

在審

• 申請號: 201610084177.3
• 申請日: 2016-02-04
• 公開（公告）號: CN105532479A
• 公開（公告）日: 2016-05-04
• 發明（設計）人: 張笑宇;鄧香蘭;周洪友;于卓;高翔;盧艷麗
• 申請（專利權）人: 內蒙古農業大學
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 北京紀凱知識產權代理有限公司 11245
• 代理人: 關暢

技術領域

本發明屬于組織培養材料技術領域，具體涉及馬鈴薯莖尖分化培養基及制備方法。

背景技術

馬鈴薯病毒病是馬鈴薯生產中的重要病害，是引起馬鈴薯種性退化的主要原因。 感染病毒的馬鈴薯通過塊莖無性繁殖進行世代積累和傳遞，致使塊莖種性變劣，產量 不斷下降。生產中一旦發生，沒有很好的防治辦法。帶毒種薯是唯一的初侵染來源， 因此，控制種薯帶毒率是控制該病害行之有效的辦法。

病毒主要在植物體內的維管束和細胞間移動，植物莖尖生長點尚未形成維管束、 且病毒在細胞間移動的較慢，不能趕上莖尖生長點生長的速度，且在莖尖分生組織中， 病毒不能進行復制，因此，莖尖生長點沒有病毒。植物莖尖生長點細胞在離體情況下， 在一定營養的物質，激素和其他適宜的外界條件下，可再生成一個完整植株。據此原 理將馬鈴薯莖尖生長點剝離，放入適宜的培養基和環境條件下培養，使其分化成苗， 為組織培養技術，此技術不僅能脫去病毒，也能脫去所有的真菌和細菌，能徹底控制 馬鈴薯病毒病和其它所有病害。

國內主要采用MS培養基進行馬鈴薯莖尖培養。一些附加成分，植物生長調節劑 的種類和濃度對于莖尖生長發育的影響很大。細胞分裂素有利于離體莖尖成活和生長， 生長素用來控制莖尖成活和苗分化。因不同品種對激素反應不同，所以使用的激素種 類和濃度不能一概而論。

馬鈴薯組織培養技術在我國已經很成熟，但是，分生組織成苗慢，成苗率低的問 題還需要進一步的改進。馬鈴薯組培過程中的褐變現象也是一項難以克服的技術問題。 褐變是指外植體在培養過程中體內的多酚氧化酶被激活，使細胞里的酚類物質氧化成 褐色醌類物質，這種致死性的褐化物不但向外擴散致使培養基逐漸變成褐色，而且還 會抑制其它酶的活性，嚴重影響外植體的脫分化和器官分化，最后致使變褐死亡。能 否有效地控制褐變是馬鈴薯組培成功的關鍵。

抗氧劑(防褐劑)可能阻遏外植體切口處酚類物質的合成、分泌及氧化，而保持 組織塊的生物活性，對馬鈴薯的褐化有不同程度的抑制作用，同時也受控于外植體材 料種類和培養基類型等其他因素。

L-半胱氨酸鹽酸鹽是一種重要的有機化工中間體，在生物化學、醫藥、食品、飼 料以及化妝品等行業具有廣泛的用途。具有鈍化多酚氧化酶的作用，有很強的抗氧化 能力。它有防止和推遲食品褐變，以及解毒、防曬、預防和治療放射線對人體損傷等 作用。在組織培養中未見有使用的報道。

發明內容

本發明的目的是提供一種馬鈴薯莖尖分化培養基，所述培養基能增加馬鈴薯莖尖 分生組織分化率。

本發明所提供的馬鈴薯莖尖分化培養基的配方中含有L-半胱胺酸鹽酸鹽。

以1L培養基計算，所述L-半胱胺酸鹽酸鹽的含量為0.1mg。

所述馬鈴薯莖尖分化培養基的配方，為下述配方①或配方②：

配方①：MS培養基+IAA0.1mg/L+6-BA0.1mg/L+GA₃0.1mg/L+L-半胱胺酸鹽酸 鹽0.1mg/L+30g/L蔗糖+5-7g/L瓊脂粉；

配方②：MS培養基+NAA0.1mg/L+6-BA0.1mg/L+GA₃0.1mg/L+L-半胱胺酸鹽 酸鹽0.1mg/L+30g/L蔗糖+5-7g/L瓊脂粉。

其中，IAA為吲哚-3-乙酸，NAA為萘乙酸，6-BA為細胞分裂素，GA₃為赤霉素，

MS培養基的配方單為：mg/L工作液濃度，

大量元素：

硝酸鉀1900、硝酸銨1650、磷酸二氫鉀170、硫酸鎂(7H₂O)370、無水氯化 鈣332.2；

微量元素：

碘化鉀0.83、硼酸6.2、硫酸錳(1H₂O)16.9、硫酸鋅(7H₂O)8.6、鉬酸鈉(7 H₂O)0.25、硫酸銅(5H₂O)0.025、氯化鈷(6H₂O)0.025；

鐵鹽：

乙二胺四乙酸二鈉37.3、硫酸亞鐵27.8；

有機成分：

肌醇100、甘氨酸2、鹽酸硫胺素(VB1)0.1、鹽酸吡哆醇(VB6)0.5、煙酸 (VB5)0.5。