[發(fā)明專利]經(jīng)修飾的級(jí)聯(lián)核糖核蛋白及其用途

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201610081216.4
• 申請(qǐng)日: 2012-12-21
• 公開（公告）號(hào): CN105732816B
• 公開（公告）日: 2020-12-25
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 斯坦.喬翰.約瑟夫.布朗茲;約翰.萬德奧斯特
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 卡里布生物科學(xué)公司
• 主分類號(hào): C07K19/00
• 分類號(hào): C07K19/00;C07K14/245;C12N9/22;C12N15/62;C12N15/90
• 代理公司: 北京英賽嘉華知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限責(zé)任公司 11204
• 代理人: 王達(dá)佐;洪欣

1.I型成簇規(guī)律間隔短回文重復(fù)序列(CRISPR)相關(guān)Cse1蛋白質(zhì)亞基和FokI核酸內(nèi)切酶或經(jīng)修飾的FokI核酸內(nèi)切酶的人工融合蛋白，其中所述修飾的FokI核酸內(nèi)切酶為KKRSharkey或ELD Sharkey。

2.如權(quán)利要求1所述的人工融合蛋白，其中所述人工融合蛋白還包含核定位信號(hào)。

3.一種核酸分子，其編碼權(quán)利要求1或2所述的人工融合蛋白。

4.一種表達(dá)載體，其包含權(quán)利要求3所述的核酸分子。

5.一種級(jí)聯(lián)蛋白質(zhì)復(fù)合物，其包含權(quán)利要求1或2所述的人工融合蛋白。

6.一種核糖核蛋白復(fù)合物，其包含如權(quán)利要求1或2所述的人工融合蛋白和CRISPR RNA(crRNA)分子。

7.如權(quán)利要求6所述的核糖核蛋白復(fù)合物，其還包含Cas6蛋白質(zhì)亞基、Cas5蛋白質(zhì)亞基、Cse2蛋白質(zhì)亞基和Cas7蛋白質(zhì)亞基。

8.一種真核細(xì)胞，其包含權(quán)利要求6或7所述的核糖核蛋白復(fù)合物。

9.一種在體外修飾、可視化靶核酸，或激活或抑制靶核酸的轉(zhuǎn)錄的方法，其包含使所述的靶核酸與權(quán)利要求6或7所述的核糖核蛋白復(fù)合物接觸。

10.如權(quán)利要求9所述的方法，其中所述的修飾的方法為結(jié)合和/或切割所述靶核酸。

11.如權(quán)利要求9或10所述的方法，其中所述靶核酸為雙鏈DNA(dsDNA)。