[發(fā)明專利]一種從西蘭花種子中提取分離蘿卜硫苷的方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201610081071.8
• 申請日: 2016-02-05
• 公開（公告）號: CN105566409B
• 公開（公告）日: 2018-11-09
• 發(fā)明（設計）人: 劉儒華;劉錫建
• 申請（專利權）人: 贛州華漢生物科技有限公司
• 主分類號: C07H15/14
• 分類號: C07H15/14;C07H1/08
• 代理公司: 上海科盛知識產(chǎn)權代理有限公司 31225
• 代理人: 趙志遠

本發(fā)明涉及一種從西蘭花種子中提取分離蘿卜硫苷的方法，包括以下步驟：(1)從西蘭花種子中提取蘿卜硫苷溶液，并將其進行濃縮得到蘿卜硫苷濃縮液；(2)將蘿卜硫苷濃縮液用大孔吸附樹脂進行吸附；(3)用乙醇溶液對大孔吸附樹脂進行洗脫，得到樹脂洗脫液；(4)將樹脂洗脫液進行濃縮后，加入硅膠混合，揮發(fā)乙醇，得到吸附蘿卜硫苷的硅膠，并將其加至由硅膠填柱所得的硅膠柱上層；(5)用洗脫劑對硅膠柱進行洗脫，收集洗脫液，并將洗脫液進行濃縮、干燥，即得蘿卜硫苷產(chǎn)品。與現(xiàn)有技術相比，本發(fā)明工藝簡單易行，容易工業(yè)化，大孔樹脂和硅膠價廉、易得，整個工藝價格便宜，投資少，并且能夠得到高純度的蘿卜硫苷產(chǎn)品。

技術領域

本發(fā)明涉及天然產(chǎn)物純化方法，具體涉及一種從西蘭花種子中提取分離蘿卜硫苷的方法。

背景技術

蘿卜硫苷(4-甲基亞磺酰基丁烯基硫代葡萄糖苷)廣泛存在于十字花科植物中，如西蘭花、羽衣甘藍、抱子甘藍、花椰菜、辣根、大白菜等[中國農(nóng)學通報,2008,24(2):335-338；食品科技,2009,34(12):250-252]，其中以西蘭花、花椰菜中有效成分最多，特別是西蘭花種子中含量最高。蘿卜硫苷的降解產(chǎn)物主要蘿卜硫素，蘿卜硫素腈，嚅唑烷硫酮等，其中含量最高的是蘿卜硫素[食品科技,2009,34(12):250-252]。蘿卜硫素是迄今為止蔬菜中發(fā)現(xiàn)的抗癌活力最強的一類異硫代氰酸鹽，是目前公認的防癌和抗癌效果最好的天然產(chǎn)物之一。能夠抑制I相酶和誘導Ⅱ相酶的表達，對肝癌、乳腺癌、肺癌、食道癌、前列腺癌、胃癌有明顯的阻斷作用，并且蘿卜硫素還具有保護皮膚、抗菌、提高機體抗氧化能力和免疫力等藥理作用[食品發(fā)酵與工業(yè)，2011,37(7):197-200]。但蘿卜硫素很不穩(wěn)定，而蘿卜硫苷比較穩(wěn)定，并且可以在生物體內(nèi)水解成蘿卜硫素等，因此研究蘿卜硫苷的分離提純是非常必要的。

我國對蘿卜硫苷的分離進行了一些的研究，但目前高效分離得到高純度的蘿卜硫苷方法不多。如專利CN103709211采用花椰菜為原料提取分離蘿卜硫苷，先用弱極性的大孔樹脂初次分離后，再次用硅膠柱分離得到高純度的蘿卜硫苷，但是采用的原料蘿卜硫苷含量較低，體積較大，不易儲運，因此收率較低。專利CN102295667經(jīng)過多次萃取和制備色譜柱分離后，得到了高純度蘿卜硫苷，但是制備色譜規(guī)模小，單次得到產(chǎn)品量少，不利于工業(yè)化生產(chǎn)。因此，尋找一種通過簡單廉價的分離提純方法得到高含量的蘿卜硫苷產(chǎn)品，將對開發(fā)以蘿卜硫苷為主要活性成分的藥品和保健品的發(fā)展具有積極推動作用。

中國專利CN 104961667 A公布了一種蘿卜硫素的純化方法，該方法包括以下步驟：(1)制備蘿卜硫素溶液；(2)對蘿卜硫素溶液進行萃取，然后萃取液濃縮，得到蘿卜硫素濃縮液；(3)將蘿卜硫素濃縮液與硅藻土混合，揮發(fā)溶劑，得到吸附蘿卜硫素的硅藻土；(4)用硅藻土填柱，將吸附蘿卜硫素的硅藻土加至硅藻土柱上層；(5)用洗脫劑進行洗脫，收集不同溶劑的洗脫液；(6)將洗脫液濃縮、干燥即得吸附蘿卜硫素產(chǎn)品。該發(fā)明采用硅藻土分離蘿卜硫素，工藝簡單易行，容易工業(yè)化，硅藻土價廉、易得，整個工藝價格便宜，投資少，并且能夠得到高純度的蘿卜硫素產(chǎn)品(純度大于95％)。但該專利分離的是蘿卜硫素，蘿卜硫素是蘿卜硫苷經(jīng)黑芥子硫酸苷酶酶解或酸水解，脫掉一分子葡萄糖后生成一個中間體，并在一定條件下通過重組反應產(chǎn)生的異硫氰酸鹽衍生物。蘿卜硫苷和蘿卜硫素分子結構不同，性質有很多差異，因此分離提純方法也不一樣。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的就是為了克服上述現(xiàn)有技術存在的缺陷而提供一種操作簡單、環(huán)保節(jié)能、純度高、成本低的從西蘭花種子中提取分離蘿卜硫苷的方法。

本發(fā)明的目的可以通過以下技術方案來實現(xiàn)：一種從西蘭花種子中提取分離蘿卜硫苷的方法，主要包括以下步驟：

(1)從西蘭花種子中提取蘿卜硫苷溶液，并將所得的蘿卜硫苷溶液進行濃縮得到蘿卜硫苷濃縮液；

(2)將步驟(1)所得蘿卜硫苷濃縮液用大孔吸附樹脂進行吸附；

(3)用乙醇溶液對大孔吸附樹脂進行洗脫，得到樹脂洗脫液；