[發明專利]枸杞子的新用途有效
| 申請號： | 201610080731.0 | 申請日： | 2016-02-03 |
| 公開（公告）號： | CN107034175B | 公開（公告）日： | 2021-07-02 |
| 發明（設計）人： | 陸華;高小平;姚奏英;劉志斌;劉芊辰 | 申請（專利權）人： | 成都中醫藥大學 |
| 主分類號： | C12N5/075 | 分類號： | C12N5/075;C12N5/0735 |
| 代理公司： | 成都高遠知識產權代理事務所(普通合伙) 51222 | 代理人： | 李高峽;張娟 |
| 地址： | 611130 四川*** | 國省代碼： | 四川;51 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 枸杞子 用途 | ||
1.枸杞子在制備人胚胎干細胞定向分化為類卵細胞的誘導液中的用途；該人胚胎干細胞為人胚胎干細胞H9，購買于中科院上海干細胞庫，中國科學院干細胞庫編號：SCSP-302；
所述誘導液的制備方法為：以細胞培養基為基礎培養液，添加有終濃度為3%（v/v）的含藥血清；所述含藥血清按照如下方法制備：
（1）取枸杞子，粉碎，以5.0g/kg的劑量施用于鼠，施用方式為口服給藥；
（2）給藥30min、60min、90min后，眼底靜脈叢取血，分別靜置、離心得上清液，混勻，即為含藥血清；所述離心轉速為3000rpm，離心時間為10min；
所述細胞培養基的制備方法如下：取體積比為1:1的DMEM/ F-12培養基，加入1/4倍體積的血清替代品，混勻，再加入bFGF和非必須氨基酸，即得，其中，bFGF的終濃度為4 ng/mL，非必須氨基酸的終濃度為1%（v/v）。
2.根據權利要求1所述的用途，其特征在于：步驟（2）中，靜置的時間為2h。
3.人胚胎干細胞定向分化為類卵細胞的誘導液，其特征在于：它以細胞培養基為基礎培養液，添加有終濃度為3%（v/v）的含藥血清；所述含藥血清按照如下方法制備：
（1）取枸杞子，粉碎，以5.0g/kg的劑量施用于鼠，施用方式為口服給藥；
（2）給藥30min、60min、90min后，眼底靜脈叢取血，分別靜置、離心得上清液，混勻，即為含藥血清；所述離心轉速為3000rpm，離心時間為10min；
所述細胞培養基的制備方法如下：取體積比為1:1的DMEM/ F-12培養基，加入1/4倍體積的血清替代品，混勻，再加入bFGF和非必須氨基酸，即得，其中，bFGF的終濃度為4 ng/mL，非必須氨基酸的終濃度為1%（v/v）。
4.根據權利要求3所述的誘導液，其特征在于：步驟（2）中，靜置的時間為2h。
5.一種人胚胎干細胞定向分化為類卵細胞的方法，其特征在于：包括如下步驟 ：
a、取人胚胎干細胞；該人胚胎干細胞為人胚胎干細胞H9，購買于中科院上海干細胞庫，中國科學院干細胞庫編號：SCSP-302；
b、置于權利要求3~4任意一項所述的誘導液中培養，培養時間不低于5天，即得類卵細胞。
6.根據權利要求5所述的方法，其特征在于：步驟b中，所述培養時間為5~7天。
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