[發明專利]龍虎人丹的中暑模型的構建方法

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• 申請號: 201610080701.X
• 申請日: 2016-02-04
• 公開（公告）號: CN105535998A
• 公開（公告）日: 2016-05-04
• 發明（設計）人: 金家驊;丁禮琴;朱麗;曹無介;馬越鳴;王天明
• 申請（專利權）人: 上海中華藥業有限公司
• 主分類號: A61K49/00
• 分類號: A61K49/00;A61K36/9068;A61P25/00
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.龍虎人丹的中暑模型的構建方法，其特征在于，包括以下步驟：

步驟(1)動物的準備：清潔級的大鼠；

步驟(2)中暑模型的建立：

大鼠在清潔級動物房內常溫環境下適應性喂養3d后，在人工氣候培養 箱內進行熱暴露，箱內相對濕度55～75％，箱內溫度調節為39℃，大鼠 熱暴露1h；

常溫對照組除溫度外，其余環境條件與應激組相同，非熱暴露條件下， 大鼠在22～25℃室溫條件下飼養，普食，自由飲水，用電子肛溫計測量大 鼠肛溫，以肛溫超過40℃±1℃作為中暑造模成功大鼠；

步驟(3)給藥與樣品采集：

取中暑模型大鼠18只，雄性體重230±20g，隨機分組為中暑高、中、 低三個劑量組，每組6只；并設正常高劑量對照組6只，雄性，禁食12h；

步驟(4)樣品測定：

血漿按上述建立的LC-MS/MS及HS-SPDE-GC-MS/MS方法進行測定， 同時進行質量控制，每個分析批生物樣品測定時建立隨行標準曲線，并進 行三濃度雙樣本質控樣品分析，質控樣品CV<15％作為當日數據是否接受 的標準；

步驟(5)藥代動力學分析與統計分析：

通過每測定批次的隨行標準曲線來計算相應批次中有效成分的血漿 藥物濃度，所得濃度-時間數據。

2.根據權利要求1所述的龍虎人丹的中暑模型的構建方法，其特征在 于：步驟(1)中，所述大鼠選用Wistar大鼠230±20g，飼養室溫度為23± 2℃,濕度為60±5％，12h明暗循環，動物適應環境3天后，于實驗前禁 食12h，自由飲水。

3.根據權利要求1所述的龍虎人丹的中暑模型的構建方法，其特征在 于：步驟(3)中，低劑量組灌胃給藥龍虎人丹0.115g/kg；中劑量組灌胃 給藥龍虎人丹0.23g/kg；高劑量組灌胃給藥龍虎人丹0.92g/kg。

4.根據權利要求3所述的龍虎人丹的中暑模型的構建方法，其特征在 于：步驟(3)中，大鼠灌胃給藥后4小時提供食物，整個過程禁食不禁水， 于給藥前和給藥后5min，15min，30min，1h，2h，4h，6h，12h，24h， 48h眼底靜脈叢取血，4℃6，000×g離心10min得到血漿后，分取上層血 漿100μl，置于-80℃冰箱中保存，待測。

5.根據權利要求1所述的龍虎人丹的中暑模型的構建方法，其特征在 于：步驟(5)中，所述數據使用WinNonlin軟件Build6.1.0.173，Pharsight Corporation，MO，USA，采用非房室模型計算C_max、T_max、AUC_0-t、AUC_0-∞、 t_1/2、CL/F、Vd/F、MRT_0-t藥代動力學參數。