[發明專利]一種利用剩余污泥發酵產酸并合成微生物油脂的方法

有效

• 申請號: 201610080562.0
• 申請日: 2016-02-04
• 公開（公告）號: CN105524952B
• 公開（公告）日: 2019-10-01
• 發明（設計）人: 劉佳;黃翔峰;劉佳楠;苑明;陳銳;陸麗君;彭開銘
• 申請（專利權）人: 同濟大學
• 主分類號: C12P7/64
• 分類號: C12P7/64;C12R1/645
• 代理公司: 上海科盛知識產權代理有限公司 31225
• 代理人: 趙志遠

1.一種利用剩余污泥發酵產酸并合成微生物油脂的方法，其特征在于，包括以下步驟：

(1)以剩余污泥為原料，加入茶皂素進行厭氧發酵獲得上清液；

(2)采用鳥糞石沉淀法去除步驟(1)所得上清液中的氨氮，得到富含揮發性脂肪酸的溶液；

(3)以步驟(2)所得的溶液為培養基，采用序批式培養方式培養產油酵母；

(4)以步驟(3)培養結束得到的酵母菌細胞為原料，提取得到微生物油脂；

步驟(1)所述的厭氧發酵過程中，污泥濃度為15～20g/L，投加茶皂素0.1g/gTSS，攪拌速度為100～150rpm，發酵溫度25～30℃，發酵pH為7～9，發酵時間為6～7天；

步驟(2)所述的鳥糞石沉淀法具體為：向步驟(1)所得上清液中投加磷酸氫二鈉固體和氯化鎂高濃度母液，使溶液中N:P:Mg摩爾比為1:2.2:2.2，沉淀過程控制pH為9.0～9.5，離心分離獲取上清液；

步驟(3)所述的采用序批式培養方式培養產油酵母具體操作方式為，將酵母菌種子培養液以5％～10％(v/v)接入到步驟(2)得到的富含揮發性脂肪酸的溶液中進行培養，定期監測培養過程中酵母菌的生物量，當酵母菌不再生長時排出發酵液保留酵母菌菌體，然后以步驟(2)得到的溶液作為新鮮培養基補充進去進入下一個周期的培養，共進行3～5個周期，發酵培養過程中，初始pH為6.0，轉速150～200rpm，培養溫度為29.5-30.5℃；

步驟(4)中油脂提取采用物理研磨破碎+有機溶劑提取的方法，具體為：加玻璃珠3500rpm高速研磨5～10s，用甲醇氯仿體積比為1:1的有機溶劑提取兩次，離心后抽取并合并兩次提取的下層溶液，再以質量分數為0.15％的NaCl溶液離心清洗一次，抽取下層溶液，45-55℃條件下采用氮吹法揮發有機溶劑獲得微生物油脂；

所述的酵母菌為Cryptococcus curvatus MUCL 29819。

2.根據權利要求1所述的一種利用剩余污泥發酵產酸并合成微生物油脂的方法，其特征在于，步驟(1)所述的剩余污泥來源于采用生物法處理城市生活污水的污水處理廠。

3.根據權利要求1所述的一種利用剩余污泥發酵產酸并合成微生物油脂的方法，其特征在于，步驟(4)中酵母菌細胞收集采用離心法，生理鹽水離心清洗一次。