[發(fā)明專利]清瘟敗毒散中梔子苷的含量測定方法

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 201610080375.2
• 申請日: 2016-02-05
• 公開（公告）號: CN105548419A
• 公開（公告）日: 2016-05-04
• 發(fā)明（設計）人: 潘春暉;劉濤;楊瓊;張煊
• 申請（專利權）人: 四川德成動物保健品有限公司
• 主分類號: G01N30/34
• 分類號: G01N30/34
• 代理公司: 成都行之專利代理事務所(普通合伙) 51220
• 代理人: 廖慧敏

技術領域

本發(fā)明涉及一種含量測定方法，具體涉及清瘟敗毒散中梔子苷的含量測定方法。

背景技術

清瘟敗毒散是清代著名溫病學家余師愚所創(chuàng)制的名方，載于其所著的《疫疹一得》一書中，現(xiàn)收錄于《中華人民共和國獸藥典》2010年版二部。本藥由石膏、地黃、水牛角、黃連等14味藥材組成，是“白虎湯”、“黃連解毒湯”和“犀角地黃湯”三方加減化裁而得。清瘟敗毒散的處方包括:生石膏120g、生地黃30g、水牛角60g、黃連20g、梔子30g、牡丹皮20g、黃芩25g、赤芍25g、玄參25g、知母30g、連翹30g、桔梗25g、甘草15g、淡竹葉25g；具有瀉火解毒，涼血的功效，在獸藥臨床上主要用于治療熱毒發(fā)斑，高熱神昏。

2010年版《中華人民共和國獸藥典》二部中清瘟敗毒散的質量標準僅有顯微鑒別和黃連的薄層鑒別，很難控制其質量，保證產(chǎn)品的安全性、有效性與質量可控性。但現(xiàn)有技術中公開的梔子苷含量測定方法的檢測效果較差，不能滿足需求。

發(fā)明內容

本發(fā)明所要解決的技術問題是：現(xiàn)有技術中清瘟敗毒散用梔子苷的含量測定方法效果較差，目的在于提供含量測定效果優(yōu)異的清瘟敗毒散中梔子苷的含量測定方法。

本發(fā)明通過下述技術方案實現(xiàn)：

清瘟敗毒散中梔子苷的含量測定方法，包括以下步驟：

（1）利用清瘟敗毒散制備供試品溶液；

（2）進行液相色譜檢測，液相色譜檢測的流動相為13∶87的乙腈和水。

現(xiàn)有技術中該梔子苷的含量測定時，通常采用比例為15∶85的乙腈和水作為流動相，在該條件下，梔子苷與后一個峰的分離度R=0.86<1.5，達不到分離要求，極大影響測量的準確性。

通過本發(fā)明流動相的優(yōu)化設計，可將梔子苷與后一個峰的分離度有效增加，梔子苷與后一個峰的分離度R可達到1.61，顯著高于現(xiàn)有技術，且采用該比例的流動相進行測量時無陰性干擾，效果十分顯著。

進一步，所述供試品溶液的制備過程如下：

精密量取清瘟敗毒散1.0g、甲醇25ml，將甲醇加入清瘟敗毒散中，稱定重量，超聲處理20min，放冷至室溫，補足減失重量，過濾，濾液作為供試品溶液。

優(yōu)選地，所述液相色譜檢測中色譜柱采用C₁₈色譜柱，色譜柱的尺寸為ID4.6mm、長度250mm、粒徑5um，檢測波長238nm。

為了能有效確認梔子苷與后一個峰的分離效果，以及其他物質對梔子苷測定的影響情況，所述硅膠薄層板上還點有對照藥材溶液與陰性樣品溶液，該對照藥材溶液與陰性樣品溶液的制備方法如下：

精密量取對照藥材梔子0.1g、甲醇25ml，將甲醇加入梔子中，稱定重量，超聲處理20min，放冷至室溫，補足減失重量，過濾，濾液作為對照藥材溶液；

首先配置不包括梔子的清瘟敗毒散處方，精密量取取處方量的1/500和甲醇25ml，將甲醇加入不包括梔子的清瘟敗毒散處方中，稱定重量，超聲處理20min，放冷至室溫，補足減失重量，過濾，濾液作為陰性樣品溶液。

本發(fā)明與現(xiàn)有技術相比，具有如下的優(yōu)點和有益效果：

通過本發(fā)明流動相的優(yōu)化設計，可將梔子苷與后一個峰的分離度有效增加，梔子苷與后一個峰的分離度R可達到1.61，顯著高于現(xiàn)有技術，且采用該比例的流動相進行測量時無陰性干擾，效果十分顯著。

附圖說明

此處所說明的附圖用來提供對本發(fā)明實施例的進一步理解，構成本申請的一部分，并不構成對本發(fā)明實施例的限定。在附圖中：

圖1為實施例1中對照品溶液的檢測結果示意圖。

圖2為實施例1中對照藥材溶液的檢測結果示意圖。

圖3為實施例1中供試品溶液的檢測結果示意圖。

圖4為實施例1中陰性樣品溶液的檢測結果示意圖。

圖5為實施例2中對照藥材溶液的檢測結果示意圖。

圖6為實施例2中供試品溶液的檢測結果示意圖。

具體實施方式

為使本發(fā)明的目的、技術方案和優(yōu)點更加清楚明白，下面結合實施例和附圖，對本發(fā)明作進一步的詳細說明，本發(fā)明的示意性實施方式及其說明僅用于解釋本發(fā)明，并不作為對本發(fā)明的限定。

實施例1

清瘟敗毒散中梔子苷的含量測定方法，包括以下步驟：

（1）分別利用清瘟敗毒散、梔子和不包括梔子的清瘟敗毒散處方制備供試品溶液、對照藥材溶液、對照品溶液、以及陰性樣品溶液；具體制備過程如下：