[發明專利]一種清瘟敗毒散中梔子苷含量測定用預處理方法

在審

• 申請號: 201610080374.8
• 申請日: 2016-02-05
• 公開（公告）號: CN105699549A
• 公開（公告）日: 2016-06-22
• 發明（設計）人: 潘春暉;劉濤;楊瓊;張煊
• 申請（專利權）人: 四川德成動物保健品有限公司
• 主分類號: G01N30/06
• 分類號: G01N30/06
• 代理公司: 成都行之專利代理事務所(普通合伙) 51220
• 代理人: 廖慧敏

技術領域

本發明涉及一種預處理方法，具體涉及一種清瘟敗毒散中梔子苷含量測定用預處理方法。

背景技術

清瘟敗毒散是清代著名溫病學家余師愚所創制的名方，載于其所著的《疫疹一得》一書中，現收錄于《中華人民共和國獸藥典》2010年版二部。本藥由石膏、地黃、水牛角、黃連等14味藥材組成，是“白虎湯”、“黃連解毒湯”和“犀角地黃湯”三方加減化裁而得。清瘟敗毒散的處方包括:生石膏120g、生地黃30g、水牛角60g、黃連20g、梔子30g、牡丹皮20g、黃芩25g、赤芍25g、玄參25g、知母30g、連翹30g、桔梗25g、甘草15g、淡竹葉25g；具有瀉火解毒，涼血的功效，在獸藥臨床上主要用于治療熱毒發斑，高熱神昏。

2010年版《中華人民共和國獸藥典》二部中清瘟敗毒散的質量標準僅有顯微鑒別和黃連的薄層鑒別，很難控制其質量，保證產品的安全性、有效性與質量可控性。但現有技術中公開的梔子苷含量測定方法的檢測效果較差，不能滿足需求。

發明內容

本發明所要解決的技術問題是：現有技術中清瘟敗毒散用梔子苷的含量測定的檢測效果較差，目的在于提供含量測定效果穩定且重復性高的一種清瘟敗毒散中梔子苷含量測定用預處理方法。

本發明通過下述技術方案實現：

一種清瘟敗毒散中梔子苷含量測定用預處理方法，包括：

精密量取清瘟敗毒散1.0g，按照20～50ml/g的加入量將濃度為50%以上的甲醇溶液加入清瘟敗毒散中，稱定重量，提取，冷卻至室溫，用甲醇溶液補足減失重量，過濾后獲得濾液即可。

現有技術中在進行梔子苷的含量測定之前，要先對原料進行預處理，然后再將其加入層析柱上進行含量測定，通常原料預處理方式的不同會導致檢測的結果存在極大差異，對檢測結果的重復性、穩定度等均造成極大地影響。并且由于藥物中其他成份對待測成份造的干擾作用，因而適用于其中一種藥物的預處理手段不一定適用于另一種藥物，因而不同藥物組份的預處理手段也不盡相同。

現有技術中，并沒有一種能夠很好適用于清瘟敗毒散中梔子苷含量測定的預處理方法，本發明根據清瘟敗毒散中的組成成份和比例，設計出一種預處理方法，可以有效避免清瘟敗毒散中其他物質對梔子苷含量測定的影響，且經過該方式處理后使檢測結果的穩定性、重復性均得到極大地提高，而且平均加樣回收率以及加樣回收率的RSD值也得到顯著提高，效果十分顯著。

進一步，所述提取方法為功率100W、頻率40KHz的超聲提取，或提取時間為30min的加熱回流提取。

優選地，所述提取方法為超聲提取時，超聲提取的時間大于30min。

作為最優地一種設置方式，所述甲醇溶液的濃度為75%，甲醇溶液的加入量為25ml/g。

本發明與現有技術相比，具有如下的優點和有益效果：

通過本發明的優化設計，使檢測結果的穩定性、重復性均得到極大地提高，而且平均加樣回收率以及加樣回收率的RSD值也得到顯著提高，效果十分顯著。

具體實施方式

為使本發明的目的、技術方案和優點更加清楚明白，下面結合實施例，對本發明作進一步的詳細說明，本發明的示意性實施方式及其說明僅用于解釋本發明，并不作為對本發明的限定。

實施例1

一種清瘟敗毒散中梔子苷含量測定用預處理方法，具體制備過程如下：

精密量取清瘟敗毒散1.0g，按照25ml/g的加入量將濃度為75%的甲醇溶液加入清瘟敗毒散中，稱定重量，功率100W、頻率40KHz的超聲提取，冷卻至室溫，用甲醇溶液補足減失重量，過濾的濾液即為供試品溶液。

利用供試品溶液進行液相色譜檢測，具體檢測過程如下：

液相色譜檢測的流動相選擇為13∶87的乙腈和水。所述液相色譜檢測中色譜柱采用C₁₈色譜柱，色譜柱的尺寸為ID4.6mm、長度250mm、粒徑5um，檢測波長238nm。

檢測結果：

（1）取10ul的供試品溶液六份分別進行液相色譜檢測，根據檢測得到的梔子苷的峰面積計算得出RSD值為1.098%；

（2）將供試品溶液10ul在0、2、4、6、8、10h時分別進樣進行液相色譜檢測，根據檢測得到的梔子苷的峰面積計算得出RSD值為0.335%；

（3）配置0.2732mg/mL的梔子苷對照品，將供試品溶液10ul和梔子苷對照品10ul進行液相色譜檢測，根據峰面積計算平均加樣回收率為99.60%，加樣回收率的RSD值為0.76%。