[發明專利]一種用HPLC同時測定藤茶中11種黃酮類成分的方法

有效

• 申請號: 201610079019.9
• 申請日: 2016-02-05
• 公開（公告）號: CN105717229B
• 公開（公告）日: 2017-10-27
• 發明（設計）人: 許明;鄭金貴;劉江洪;曹曉華;楊志堅
• 申請（專利權）人: 福建農林大學
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N21/33
• 代理公司: 福州元創專利商標代理有限公司35100
• 代理人: 蔡學俊

1.一種用HPLC同時測定藤茶中11種黃酮類成分的方法，其特征在于，包括以下步驟：

1）混合標準品溶液的制備：分別精密稱取適量的二氫楊梅素、二氫槲皮素、香橙素、柚皮素、橙皮素、楊梅素、楊梅苷、山奈酚、槲皮素、蘆丁和芹菜素標準品于10 mL棕色容量瓶中，用無水甲醇溶解并定容至刻度，得到各成分濃度分別為112.5、135、150、125、165、125、210、138、99、300、100mg·L^-1的混合標準品溶液；

2）供試樣品溶液的制備：將藤茶樣品用液氮研磨成粉末，冷凍干燥至含水量小于5%，然后將其粉碎、過篩后，稱取所得凍干粉0.1 g于三角瓶中，加入10 mL無水甲醇，搖勻，37℃振蕩提取12 h，4500 r/min離心15 min，殘渣再加10 mL無水甲醇，于相同條件下重復提取1次，并用少量無水甲醇洗滌殘渣，合并3次上清液并定容至25 mL，得供試樣品溶液；

3）將所得混合標準品溶液與供試樣品溶液分別經0.45μm有機微孔濾膜過濾后，采用高效液相色譜進行檢測，經計算獲得供試樣品中二氫楊梅素、二氫槲皮素、香橙素、柚皮素、橙皮素、楊梅素、楊梅苷、山奈酚、槲皮素、蘆丁和芹菜素的含量；

其高效液相色譜的條件為：色譜柱：VisionHT C18柱，250mm×4.6mm，5μm；流動相：無水甲醇-0.4wt%磷酸水溶液；流速：1.0 mL·min^-1；柱溫：30℃；進樣體積：5μL；檢測波長：290 nm，360 nm；梯度洗脫程序為：0~20 min，無水甲醇的體積濃度為30%；20~30 min，無水甲醇的體積濃度由30%增加至40%；30~45 min，無水甲醇的體積濃度由40%增加至42%；45~60 min，無水甲醇的體積濃度由42%增加至50%。

2.根據權利要求1所述用HPLC同時測定藤茶中11種黃酮類成分的方法，其特征在于，所述藤茶樣品為藤茶的嫩莖葉。