[發明專利]一種從毛葉香茶菜中制備冬凌草甲素的方法

有效

• 申請號: 201610078427.2
• 申請日: 2016-02-03
• 公開（公告）號: CN105732653B
• 公開（公告）日: 2017-12-15
• 發明（設計）人: 代麗萍;趙猛;時博;呼海濤;劉孟奇;趙嬌嬌;張玲霞;陳隨清
• 申請（專利權）人: 河南中醫藥大學
• 主分類號: C07D493/10
• 分類號: C07D493/10
• 代理公司: 鄭州天陽專利事務所(普通合伙)41113
• 代理人: 王逢伍

1.一種從毛葉香茶菜中制備冬凌草甲素的方法，其特征在于，包括以下步驟：

1）上樣液的制備：毛葉香茶菜干燥藥材1kg粉碎，過40目藥典篩，每次加質量濃度為95%的乙醇10L，提取3次，每次1.5h，合并3次提取液，減壓回收溶劑至無醇味，加水分散，減壓回收溶劑至無醇味，水分散，在3600 r/min下離心30 min，傾取上清液，不溶物加100ml體積濃度為15%的乙醇溶解，在3600 r/min下離心30 min，合并兩次上清液制得上樣液；

2）樹脂預處理：方法是，Sephadex LH-20樹脂用甲醇浸泡24h后，傾去甲醇液，用體積濃度為15%的甲醇浸泡12h，每2h置換一次溶劑，濕法裝柱，用體積濃度為15%的甲醇洗脫2個柱體積，得預處理好的Sephadex LH-20樹脂；

3）裝柱與上樣：將步驟2）預處理好的樹脂濕法裝柱，于內徑為5cm的層析柱，使樹脂床徑高比達1︰15，再將步驟1）中的上樣液1000ml自然流速通過樹脂柱吸附完全；

4）分離純化：樹脂柱先用體積濃度為15%的甲醇洗脫1500ml，再用30%的甲醇洗脫4000ml，收集體積濃度為30%甲醇的洗脫液，減壓回收溶劑，得相對密度為1.243的稠浸膏；

5）重結晶：將上述稠浸膏用20ml甲醇溶解，在-20℃-35℃下靜置24-72h，去除上清液，析出白色粉末狀結晶，過濾，得白色結晶狀粉末，上清液繼續放置24-72h，析出白色粉末狀結晶，過濾，得白色結晶狀粉末，合并兩次白色結晶狀粉末，即得冬凌草甲素0.523g，采用HPLC法面積歸一化法計算其純度大于96.81%。

2.一種從毛葉香茶菜中制備冬凌草甲素的方法，其特征在于，包括以下步驟：

1）上樣液的制備：毛葉香茶菜干燥藥材1kg，粉碎，過60目藥典篩，每次加質量濃度為95%的乙醇12L，提取3次，每次2h，合并3次提取液，減壓回收溶劑至無醇味，加水分散，減壓回收溶劑至無醇味，加水分散，在3600r/min下離心30min，傾取上清液，不溶物加200ml體積濃度為20%的乙醇溶解，在3600r/min下離心30min，合并兩次上清液制得上樣液；

2）樹脂預處理：方法是，Sephadex G樹脂用甲醇浸泡24h，傾去甲醇液，用20%的甲醇浸泡12h，每2h置換一次溶劑，濕法裝柱，用體積濃度為20%的甲醇洗脫2個柱體積，得預處理好的Sephadex G樹脂；

3）裝柱與上樣：將步驟2）預處理好的樹脂濕法裝柱，于內徑為5cm的層析柱，使樹脂床徑高比達1︰15，再將步驟1）中的上樣液500mL自然流速通過樹脂柱，吸附完全；

4）分離純化：樹脂柱先用體積濃度為20%的甲醇洗脫1000ml，再用30%的甲醇洗脫3000ml，收集體積濃度為30%甲醇的洗脫液，減壓回收溶劑，得相對密度為1.321的稠浸膏；

5）重結晶：將上述稠浸膏用乙醇溶解20 ml，在-20℃-35℃下靜置24-72h，去除上清液，析出白色粉末狀結晶，過濾，得白色結晶狀粉末，上清液繼續放置24-72h，析出白色粉末狀結晶，過濾，得到白色結晶狀粉末，合并上述白色結晶狀粉末，制得冬凌草甲素0.5021g，采用HPLC法面積歸一化法計算其純度大于95.12%。