[發明專利]一種棕點石斑魚與清水石斑魚的人工雜交育種方法

有效

• 申請號: 201610076634.4
• 申請日: 2016-02-03
• 公開（公告）號: CN105532545B
• 公開（公告）日: 2019-04-19
• 發明（設計）人: 蔡春有;陳國華;蔡有森;蔡四川;蔡建順;蔡惠明;蔡金泉
• 申請（專利權）人: 海南晨海水產有限公司
• 主分類號: A01K61/10
• 分類號: A01K61/10
• 代理公司: 海口興南知識產權事務有限公司 46002
• 代理人: 戴巨龍

1.一種棕點石斑魚與清水石斑魚的人工雜交育種方法，其特征在于，包括以下步驟：

(1)親本選擇

a.雌性親本：選擇5齡以上、體型正常、無病害、活力強的健康棕點石斑魚作為雌性親本；

b.雄性親本：選擇5齡以上、體型正常、無病害、活力強的健康清水石斑魚作為雄性親本；

(2)親本的培育

a.采用池塘控溫培育親本，保證二種親本的性腺發育在時間上達到同步成熟；

b.棕點石斑魚親魚培育池塘的規格及水溫控制：培育親本的池塘為露天池塘，取自然水溫，池塘面積1畝，水深3－3.5m，設進、排水口各1個，培育密度200－300尾/畝，雌雄比例1：1，當春季水溫上升至24℃開始進入強化培育；

c.清水石斑魚親魚培育池塘的規格及水溫控制：培育親本的池塘須加蓋保溫棚，春季水溫較同期的露天池塘水溫高出2℃左右，池塘面積1畝，水深3－3.5m，設進、排水口各1個，培育密度150－200尾/畝，雌雄比例1：1；春季水溫上升至26℃開始進入強化培育；

d.日常培育的飼料種類與投喂量：二種親本都以小魷魚、藍圓鲹、鮐魚作為主要飼料，

適合的飼料魚塊長6－8cm、寬4－6cm，每天投喂飼料1次，下午投喂，每次投喂量控制在魚體重的2％－2.5％；

e.強化培育的飼料種類與投喂量：春季水溫上升，當露天池塘的水溫上升至24℃時，加蓋保溫棚的池塘水溫上升至26℃左右，二種親本同時進入強化培育階段，二種親本都以小魷魚、藍圓鲹、鮐魚作為飼料，每個魚塊飼料中塞入維生素E軟膠囊1粒50mg投喂，每天投喂1次，日投喂量為親魚體重的2－3％，實際投喂量受天氣、水溫條件影響而有增減；

(3)親魚性腺發育程度的檢查和判斷

a.對親本進行強化培育二周后，每周從親魚群體中挑選部分個體進行一次成熟度檢查；

b.棕點石斑魚雌性親本的檢查：從棕點石斑魚群體中選擇雌性個體，置于平臺上實施檢查，外觀上腹部隆起，生殖孔微紅，即可初步判定為達到性成熟；

c.清水石斑魚雄性親本的檢查：從清水石斑魚群體中選擇雄性個體，置于平臺上實施檢查，在魚腹部，用手從魚腹部向生殖孔方向推擠，能擠出白色精液的個體即已經達到性成熟；

(4)人工受精

a.采精：取清水石斑魚成熟的雄性個體，用干毛巾將魚腹部擦干，酒精棉球對生殖孔消毒，用手在魚體腹部，從前向生殖孔方向推擠，任乳白色的精液從生殖孔流出，用10mL注射器，將精液吸取，一尾成熟的雄性個體可取得精液3－8mL，注入試管中，備用；

b.擠卵：用濕毛巾將棕點石斑魚魚體包裹，暴露生殖孔，操作者戴上乳膠手套，用手指插入魚的生殖孔，將生殖孔打開，然后用手在魚腹部從前向生殖孔方向推擠，成熟卵子即可流出，在生殖孔下方用盆接住流出的卵子；

c.人工授精：向盛有卵子的盆內加入干凈海水，1千克卵子加入海水10L，一邊加水一邊輕輕攪動，同時加入經過海水稀釋的清水石斑魚精液，加入量為每千克卵子10mL，精卵混勻之后靜置3－5min，之后用干凈的海水沖洗受精卵3－4遍；

(5)受精卵的孵化

準備一個容積500L、底部設有排水閥的孵化桶，在孵化桶內放置氣石充氣，將經過步驟(4)處理過的受精卵放入孵化桶中孵化，受精卵孵化條件為水溫25－30℃，鹽度28－33，pH7.8～8.5，孵化密度為250－300萬粒受精卵/m ³，孵化過程中，發現其中有死卵或未受精卵需及時排除，每2小時換水一次，每次換水量為孵化桶容積的一半，以保持孵化桶內海水的清新；

(6)受精卵的包裝運輸

a.雜種受精卵經孵化8小時左右，胚胎發育至原腸期，即將受精卵包裝、運輸至育苗場，受精卵在孵化24－26小時后，即可孵出仔魚，用于人工育苗；

b.包裝運輸方法是用尼龍袋充氧運輸法，一只70cm×40cm的尼龍袋，裝上過濾海水5－8L，約占尼龍袋容積的1/4，放入受精卵100g，排除袋內空氣，充進氧氣并扎緊袋口，再用紙箱或泡沫塑料箱包裝好，立即裝上運輸工具；

所述步驟(4)a中，將取出的精液注入試管，密封，4℃暫存，備用，暫存的精液在一周內仍有授精能力；

所述步驟(4)b中，對成熟雌性棕點石斑魚合適的擠卵時機是農歷初一至初六，人工授精操作的當天下午，提前從培育池塘中起捕棕點石斑魚親魚，選擇出雌性親魚，暫養于水泥池中，于20：00－24：00實施人工授精；

所述步驟(4)c中，清水石斑魚精液較濃密，須用海水稀釋后使用，稀釋的方法是：將備用的精液取出1mL，注入燒杯，加入9mL海水，晃動燒杯，將精液與海水快速混均，立即加入到已經加入海水的卵子中，從精子加入海水稀釋至將稀釋后的精液加入卵子中，全過程在1分鐘內完成；

雜種受精卵在24－25℃水溫條件下，胚胎發育時間約24－26h，如果預計到達目的地之前雜種受精卵可能在運輸過程中孵化出仔魚，則不能使用受精卵運輸的方式，改為運輸仔魚；

所述步驟(6)中，運輸受精卵，氣溫高時，包裝箱中需加上適量冰袋降溫，適宜的運輸溫度為24－25℃度；

所述運輸仔魚的方法，步驟如下：待仔魚全部出膜后，停止充氣5～10min，仔魚上浮到水面，死胚胎沉底，用排除死卵或未受精卵的方法將死胚胎和下層多余的水排除，從孵化桶的上層用盆小心將仔魚取出，用尼龍袋充氧運輸法，每千克受精卵孵出的仔魚，需要包裝成30袋。