[發(fā)明專利]一種紫花杯冠藤組培快繁的方法

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201610073227.8
• 申請(qǐng)日: 2016-02-03
• 公開（公告）號(hào): CN105706925A
• 公開（公告）日: 2016-06-29
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 孫國(guó)峰;李曉東;林秦文;王亮生;吳東啟
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 中國(guó)科學(xué)院植物研究所
• 主分類號(hào): A01H4/00
• 分類號(hào): A01H4/00
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種紫花杯冠藤組培快繁的方法，其特征在于，包括如下步驟：

(1)外植體的選擇及處理：選用帶有腋芽的野外植株，用干凈的剪刀剪下帶有2個(gè)腋芽的莖段，把莖段用干凈的封口袋保存，保存時(shí)間不超過兩天并且不能沾水；

(2)外植體的消毒：把步驟(1)得到的莖段放在燒杯中，先加入2～4滴洗潔精，再加水沖洗2～3次至無泡沫，沖洗時(shí)間不能過長(zhǎng)以免造成二次污染，然后將其在超凈臺(tái)中先用體積濃度70％的酒精浸0.5～2分鐘，無菌水沖洗2～4次，用加兩滴吐溫的質(zhì)量濃度為5％的次氯酸鈉溶液消毒3～7分鐘后用無菌水洗4～6次；再用加兩滴吐溫的質(zhì)量濃度0.1％的升汞消毒5～15分鐘，后用無菌水洗5～6次；

(3)接種培養(yǎng)：將莖段剪成1cm的小段，每段帶兩個(gè)腋芽，將其接種到接種培養(yǎng)基上，所述的接種培養(yǎng)基為MS+6-BA0.05mg/L+IBA0.1mg/L+糖30g/L；

(4)繼代增殖培養(yǎng)：接種成功后將分化的芽接種到繼代增殖培養(yǎng)基上進(jìn)行繼代增殖，每次繼代30天，所述的繼代增殖培養(yǎng)基為MS+6-BA1mg/L+IBA0.1mg/L+糖30g/L；

(5)生根培養(yǎng)：將經(jīng)過繼代培養(yǎng)的分化芽轉(zhuǎn)移到生根培養(yǎng)基上誘導(dǎo)生根，所述的生根培養(yǎng)基為1/2MS+IBA0.1～0.2mg/L+糖20g/L。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的紫花杯冠藤組培快繁的方法，其特征在于，步驟(4)所述的繼代增殖培養(yǎng)，如在繼代過程中苗有細(xì)弱現(xiàn)象，則用所述的繼代增殖培養(yǎng)基和MS+6-BA0.05mg/L+IBA0.1mg/L+糖30g/L培養(yǎng)基交替使用培養(yǎng)以達(dá)到壯苗目的，每30天更換一次。

3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的紫花杯冠藤組培快繁的方法，其特征在于，步驟(3)、(4)和(5)的培養(yǎng)條件均為：23±1℃，光照時(shí)間12小時(shí)/天，光照強(qiáng)度2000Lx，pH值為6.2。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的紫花杯冠藤組培快繁的方法，其特征在于，還包括組培苗移栽，具體如下：

組培苗根長(zhǎng)出2～3cm時(shí)出瓶，出瓶前練苗一周，先將培養(yǎng)瓶移至溫室，自然條件下煉苗2d，然后解開封口膜，煉苗5d，煉苗完成后取出小苗洗凈根部附著的培養(yǎng)基，用多菌靈1000倍液或百菌清1000倍液清洗并浸泡幼苗根部，防止病害的發(fā)生，移栽到經(jīng)消毒的栽培基質(zhì)中，溫度控制在24-26℃，濕度控制在70％，15d以后逐漸降低濕度，直至將移栽苗置于自然條件下，煉苗移栽期間適當(dāng)遮光，使光照強(qiáng)度為自然光的50％。

5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的紫花杯冠藤組培快繁的方法，其特征在于，所述的栽培基質(zhì)用腐殖土、園土和沙按照1∶1∶1的體積比混合而成。

6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的紫花杯冠藤組培快繁的方法，其特征在于，步驟(2)所述外植體的消毒方法為：把步驟(1)得到的莖段放在燒杯中，先加入3滴洗潔凈，再加水沖洗3次至無泡沫，然后將其在超凈臺(tái)中先用體積濃度70％的酒精浸1分鐘，無菌水沖洗2次，用加入兩滴吐溫的質(zhì)量濃度為5％的次氯酸鈉消毒5分鐘后用無菌水洗5次；再用加入兩滴吐溫的質(zhì)量濃度0.1％的升汞消毒10分鐘，后用無菌水洗6次。