[發明專利]高致病性副溶血弧菌快速檢測引物及試劑盒在審
| 申請號： | 201610072436.0 | 申請日： | 2016-02-02 |
| 公開（公告）號： | CN105624299A | 公開（公告）日： | 2016-06-01 |
| 發明（設計）人： | 姚學良;徐曉麗;張振奎;包海巖;蔡琰 | 申請（專利權）人： | 天津市水產技術推廣站 |
| 主分類號： | C12Q1/68 | 分類號： | C12Q1/68;C12N15/11 |
| 代理公司： | 天津市北洋有限責任專利代理事務所 12201 | 代理人： | 陸藝 |
| 地址： | 300221 *** | 國省代碼： | 天津;12 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 致病性 溶血 弧菌 快速 檢測 引物 試劑盒 | ||
1.高致病性副溶血弧菌快速檢測引物，其特征是由外引物和內引物組成，所述外引物由SEQ IDNO.1所示的外引物上游引物和SEQIDNO.2所示的外引物下游引物組成；所述內引物由SEQ IDNO.3所示的內引物上游引物和SEQIDNO.4所示的內引物下游引物組成。
2.高致病性副溶血弧菌快速檢測試劑盒，其特征是包括：
(1)TE緩沖液，其組成為20mmol/LTris-HCl，2mmol/LEDTA，溶劑是蒸餾水，pH＝8.0；
(2)BstDNA聚合酶：濃度為8U/μl的BstDNA聚合酶；
(3)LAMP反應液，每24μlLAMP反應液的組成為：2.5μl10×反應緩沖液；3μl濃度為 2.5mmol/L的dNTP；1μl濃度為5μmol/L的由SEQIDNO.1所示的外引物上游引物，1μl濃度 為5μmol/L的由SEQIDNO.2所示的外引物下游引物，1μl濃度為40μmol/L的由SEQIDNO.3 所示的內引物上游引物，1μl濃度為40μmol/L的由SEQIDNO.4所示的內引物下游引物；1μl 鈣黃綠素與錳離子形成的配合物、13.5μlDEPC水；
(4)陽性對照膜片，用下述方法制成：吸取高致病性副溶血弧菌培養液將FTA膜片充分潤 濕后室溫干燥，放入盛有200μlTE緩沖液的洗滌管中震蕩洗滌1次，每次2min，充分干燥；
(5)陰性對照膜片，用下述方法制成：吸取DEPC水將FTA膜片充分潤濕后室溫干燥，放 入盛有200μlTE緩沖液的洗滌管震蕩洗滌1次，每次2min，充分干燥；
(6)無菌封裝的FTA膜片、研磨棒、吸管，采集管，洗滌管，檢測管。
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