[發明專利]一種產α-淀粉酶的勒克氏菌屬菌株

有效

• 申請號: 201610071794.X
• 申請日: 2016-02-02
• 公開（公告）號: CN105524873B
• 公開（公告）日: 2018-12-07
• 發明（設計）人: 屈建航;尹伊;李海峰;王金水;胡元森;翟丹丹;賈峰;張帥兵;屈凌波
• 申請（專利權）人: 河南工業大學
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C12N9/26;C12R1/01
• 代理公司: 鄭州中民專利代理有限公司 41110
• 代理人: 姜振東

一種產α?淀粉酶的菌株及其產生的酸性α?淀粉酶，其特征在于：該菌株的名稱為勒克氏菌屬（Leclercia sp.）菌株Z1?2?1，于2015年11月5日保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，菌種保藏號為 CGMCC No. 11587。該菌株為自主分離自土壤并經紫外誘變育種篩選而得到。利用該Z1?2?1菌株發酵制備的酸性α?淀粉酶，耐受pH范圍3.4?6.4，最適作用pH6.0，最適作用溫度55℃，于80℃下仍有酶活，在Ca²⁺ 1 mmol/L時酶活最高，為未加Ca²⁺的124%，一定濃度的Ca²⁺對酶活有促進作用。

技術領域

本發明涉及一種產α-淀粉酶的菌株及其產生的酸性α-淀粉酶以及其酶學性質，屬于生物工程領域。

背景技術

α-淀粉酶可作用于淀粉的α-1, 4 糖苷鍵，能夠快速有效地分解淀粉，廣泛應用于紡織、發酵及制糖等諸多方面，在工業生產中占有極其重要的地位，是目前用途較廣泛的一種酶制劑。特別是微生物產α-淀粉酶已廣泛應用于食品、飲料、制藥、紡織等行業。

不同的α-淀粉酶來自不同的植物、動物、微生物。微生物由于其生物多樣性以及基因操作使得酶更易于積累，現在利用微生物發酵富集生產已經逐漸替代了傳統從復雜真核細胞中提取α-淀粉酶的方法，成為工業α-淀粉酶生產的重點。

目前，工業生產中α-淀粉酶主要來自芽孢桿菌與曲霉。高效菌種的獲得是微生物發酵α-淀粉酶的關鍵前提，大多從發酵廢液、海底火山口處、酒糟或富含淀粉的土樣中分離，誘變育種有助于進一步篩選高產菌株。

發明內容

本發明的目的正是基于上述現有技術狀況而提供一種自主分離并經物理誘變篩選培育而得到的產α-淀粉酶的菌株及其產生的酸性α-淀粉酶，并得到其酸性α-淀粉酶酶學性質。

本發明的目的是通過以下技術方案來實現的：

一種產α-淀粉酶的菌株，菌株的名稱為勒克氏菌屬（Leclercia sp.）的菌株Z1-2-1，該菌株2015年11月5日保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，地址：北京市朝陽區北辰西路1號院3號，菌種保藏號為 CGMCC No. 11587。

該Z1-2-1菌株為自主分離自土壤并經紫外誘變育種篩選而得到，該菌株16S rRNA基因序列已提交GenBank數據庫，登錄號為KU055632。

更具體的說，本發明對自然篩選出菌株Z1-2進行紫外誘變，在經十代傳代并測定酶活后，挑選出酶活較高且傳代穩定菌株Z1-2-1，為62.70 U/mL。

本發明提供了菌株Z1-2-1 的酸性α-淀粉酶熱穩定性性質，所述酸性α-淀粉酶最適溫度在55℃，酶在40-50℃下相對較穩定，在60℃放置60min后，仍有較高殘余酶活。

本發明提供了菌株Z1-2-1 的酸性α-淀粉酶pH穩定性性質，所述酸性α-淀粉酶在pH6.0時酶活性最高，pH5.0-6.0間酶活性下降不大，該酶pH耐受范圍為3.4-6.4。

本發明提供了菌株Z1-2-1 的酸性α-淀粉酶Ca²⁺對其的影響，Z1-2-1在Ca²⁺濃度為1 mmol/L時酶活最高，為對照的124%，一定濃度的Ca²⁺對酶活有促進作用。5、10、15、20mmol/L Ca²⁺濃度對酶活有抑制作用，且隨濃度升高抑制作用越強。

本發明的有益效果：自采集的面粉廠土壤中篩選獲得一種產酸性α-淀粉酶的細菌菌株Z1-2-1（Leclercia sp. Z1-2-1），所產酸性α-淀粉酶酶活較高，使用pH范圍廣，具有良好的耐酸性和一定的耐高溫性。