[發明專利]檢測KAPPA輕鏈含量的試劑盒、方法及用途

在審

• 申請號: 201610071361.4
• 申請日: 2016-02-02
• 公開（公告）號: CN105548573A
• 公開（公告）日: 2016-05-04
• 發明（設計）人: 崔曉辰;夏德習;曹慈;王慶國;宿明明
• 申請（專利權）人: 濰坊三維生物工程集團有限公司
• 主分類號: G01N33/68
• 分類號: G01N33/68
• 代理公司: 常州佰業騰飛專利代理事務所(普通合伙) 32231
• 代理人: 陳書華

技術領域

本發明屬于檢測KAPPA輕鏈含量的技術領域，具體涉及一種檢測KAPPA 輕鏈含量的試劑盒、方法及用途。

背景技術

輕鏈(Lightchain，L)大約由214個氨基酸殘基組成，通常不含碳水化合 物，分子量約為24kD。每條輕鏈含有兩個由鏈內二硫鍵所組成的環肽。L鏈共 有兩種類型：KAPPA(κ)與Lambda(λ)，同一個天然免疫球蛋白分子上L鏈 的類型總是相同的。正常人血清中的κ：λ約為2：1。

細胞克隆的異常增生將導致單克隆球蛋白或游離免疫球蛋白片段(游離的 輕鏈)的增加，這將造成κ與λ鏈的比例失衡，κ與λ的比值失常預示了單克隆Y 球蛋白血癥。在生成增加的情況下，游離輕鏈的濾過也增加，當超出腎小管的 重吸收能力時，該測試可以定量檢測結合及游離免疫球蛋白中的輕鏈。

定量檢測不同種類的輕鏈含量有助于診斷巨球蛋白血癥(巨型球蛋白生成 增多)及結締組織病(如類風濕性關節炎、系統性紅斑狼瘡)等疾病。

此外，感染、急慢性肝炎、肝硬化等血中輕鏈也可增多，但一般均表現為κ、 λ同時增多；腎病、糖尿病等患者尿也可出現κ、λ同時增多。

現有的KAPPA輕鏈檢測技術存在諸多不足：如需要特殊的設備，樣本需要 預處理，不能上全自動生化分析儀進行批量檢測分析等。酶聯免疫法應用比較 普遍，其原理是將特異性抗體與固相載體連接，形成固相抗體；洗滌除去未結 合的抗體及雜質；加待測樣品，使之與固相抗體反應一段時間，讓樣品中抗原 與固相載體上的抗體結合；洗滌除去未結合的物質；加酶標抗體，使固相免疫 復合物上的抗原與酶標抗體結合；洗滌除去未結合的酶標抗體；此時固相載體 上的酶量與樣品中的待測物質的量正相關；加入底物反應顯色。根據顏色反應 的程度對測定物質進行定性或定量測定。該方法為非均相免疫檢測系統，測定 過程較為繁瑣，耗時長，缺少單位測試運行時間；自動化程度不高，批間差和 重復性相對較大；需要配備多種專門設備，一定程度上增加了成本。

隨著樣本檢驗數量的不斷增加，臨床上迫切需要一種更為簡便、快捷的方 法來進行規模化批量操作。免疫比濁法檢測KAPPA輕鏈濃度可直接在全自動生 化分析儀上完成批量樣本分析，操作簡單、可實現快速、高通量樣本的檢測。

發明內容

本發明實施例的目的在于克服現有技術的上述不足，提供一種檢測KAPPA 輕鏈含量的試劑盒，可以簡潔快速地檢測樣本中KAPPA輕鏈的含量，具有較 高的準確度和很好的特異性。

本發明實施例的另一目的在于克服現有技術的上述不足，提供一種上述的 檢測KAPPA輕鏈含量的試劑盒在檢測KAPPA輕鏈含量中的用途，可用于簡潔 快速地檢測樣本中KAPPA輕鏈的含量，具有較高的準確度和很好的特異性。

本發明實施例的再一目的在于克服現有技術的上述不足，提供一種采用上 述的檢測KAPPA輕鏈含量的試劑盒檢測KAPPA輕鏈含量的方法，可以簡潔快 速地檢測樣本中KAPPA輕鏈的含量，具有較高的準確度和很好的特異性。

為了實現上述發明目的，本發明實施例的技術方案如下：

一種檢測KAPPA輕鏈含量的試劑盒，包括：試劑R1、試劑R2和KAPPA 輕鏈校準品；所述試劑R1包括：第一緩沖液5～600mmol/L、第一電解質5～60g/L、 表面活性劑1～200g/L、第一穩定劑2～50g/L、高分子加速劑1～100g/L和第一防 腐劑0.5～15g/L；所述試劑R2包括：第二緩沖液5～600mmol/L、抗人KAPPA 輕鏈抗體0.1～20％w/v、第二電解質5～60g/L和第二防腐劑0.5～15g/L；所述 KAPPA輕鏈校準品包括：第三緩沖液10～600mmol/L、第三穩定劑2～50g/L、 第三防腐劑0.5～15g/L、抗氧化劑0.01～10g/L和KAPPA輕鏈抗原。