[發(fā)明專利]外周血單個核細胞中祛除低密度粒細胞的方法在審
| 申請?zhí)枺?/td> | 201610068790.6 | 申請日: | 2016-02-01 |
| 公開(公告)號: | CN107022523A | 公開(公告)日: | 2017-08-08 |
| 發(fā)明(設計)人: | 張思功 | 申請(專利權)人: | 蘭州大學第二醫(yī)院;張思功 |
| 主分類號: | C12N5/078 | 分類號: | C12N5/078 |
| 代理公司: | 暫無信息 | 代理人: | 暫無信息 |
| 地址: | 730000 甘*** | 國省代碼: | 甘肅;62 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 外周血 單個 細胞 祛除 密度 粒細胞 方法 | ||
1.外周血單個核細胞中祛除低密度粒細胞的方法,其特征在于,包括以下步驟:
第一步,將分離的外周血單個核細胞重懸在未加胎牛血清的RPMI 1640培養(yǎng)基中;
第二步,吸取細胞濃度1×105/ml的培養(yǎng)基溶液,放入孔板中,所述的孔板,具體是96孔板或48孔板或24孔板或12孔板或6孔板,選取96孔板時,每孔加入100ul,選取48孔板時,每孔加入300ul,選取24孔板時,每孔加入0.6ml,選取12孔板時,每孔加入1.5ml,選6孔板時,每孔加入3ml;
第三步,將孔板放入濃度為5%的CO2細胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)1小時;
第四步,吸取上清液加入到離心管中,并加入兩倍體積的磷酸緩沖鹽溶液,放入離心機中離心10分鐘;
第五步,去除上清液后用RPMI 1640培養(yǎng)基重懸外周血單個核細胞備用。
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