[發明專利]脂蛋白磷脂酶A2檢測試劑盒

在審

• 申請號: 201610068358.7
• 申請日: 2016-02-01
• 公開（公告）號: CN105717292A
• 公開（公告）日: 2016-06-29
• 發明（設計）人: 石春林;商憶文
• 申請（專利權）人: 杭州惟新生物技術有限公司
• 主分類號: G01N33/573
• 分類號: G01N33/573
• 代理公司: 北京精金石專利代理事務所(普通合伙) 11470
• 代理人: 劉曄

1.一種脂蛋白磷脂酶A2檢測試劑盒，該試劑盒包括試劑R1、試劑R2，試劑R1包括緩沖液、穩定劑、電解質、表面活性劑和防腐劑；試劑R2包括偶聯抗脂蛋白磷脂酶A2抗體的聚苯乙烯膠乳顆粒、緩沖液、穩定劑、表面活性劑和防腐劑。

2.根據權利要求1所述檢測試劑盒，其特征在于，所述緩沖液包括但不限于PBS緩沖液、Tris緩沖液、甘氨酸緩沖液、硼酸鹽緩沖液、醋酸鹽緩沖液、檸檬酸-磷酸鹽緩沖液、2-嗎啉乙磺酸緩沖液、氯化銨緩沖液以及其他具有相似性質的緩沖液中的一種或者幾種。

3.根據權利要求2所述檢測試劑盒，其特征在于，所述緩沖液為氯化銨緩沖液。

4.根據權利要求1所述檢測試劑盒，其特征在于，所述電解質包括但不限于氯化鈉、氯化鉀、氯化鈣以及其他具有類似性質的電解質中的一種或者幾種；所述表面活性劑包括但不限于SPAN系列表面活性劑、TRITON系列表面活性劑、TWEEN系列表面活性劑以及其他具有類似性質的表面活性劑中的一種或者幾種。

5.根據權利要求1所述檢測試劑盒，其特征在于，所述R1試劑為含5g/LPEG8000（聚乙二醇8000），10g/L氯化鈉，8g/L的蔗糖，5g/L的吐溫20，1g/L疊氮鈉的0.25M氯化銨緩沖液，pH值為9.0；所述R2試劑為中含有1g/L的偶聯抗脂蛋白磷脂酶A2抗體的聚苯乙烯膠乳顆粒，15g/L的蔗糖，2g/L的疊氮鈉的0.1M氯化銨緩沖液；pH值為9.0。

6.根據權利要求1所述檢測試劑盒，其特征在于，所述偶聯抗脂蛋白磷脂酶A2抗體的聚苯乙烯膠乳顆粒的制備步驟如下：

（1）聚苯乙烯膠乳顆粒的激活：在帶有羧基的聚苯乙烯膠乳顆粒中加入乙基二甲基胺丙基碳化二亞胺，混合均勻，反應結束后加入己二酸二酰肼，繼續反應，得到激活的聚苯乙烯膠乳顆粒；

（2）抗脂蛋白磷脂酶A2抗體的氧化：用高碘酸鈉將抗脂蛋白磷脂酶A2抗體Fc端糖鏈上的羥基氧化成醛基；

（3）抗脂蛋白磷脂酶A2抗體與聚苯乙烯膠乳顆粒的偶聯：將步驟（1）激活的聚苯乙烯膠乳顆粒和步驟（2）氧化的抗脂蛋白磷脂酶A2抗體混合進行反應，反應結束后，加入葡萄糖封閉聚苯乙烯膠乳顆粒上沒有發生反應的集團，獲得偶聯抗脂蛋白磷脂酶A2抗體的聚苯乙烯膠乳顆粒。

7.根據權利要求6所述檢測試劑盒，其特征在于，步驟（1）中乙基二甲基胺丙基碳化二亞胺：聚苯乙烯膠乳顆粒=0.1-1:100（重量）；己二酸二酰肼：聚苯乙烯膠乳顆粒=10-50:100（重量）；所述聚苯乙烯膠乳顆粒粒徑介于100nm-300nm之間。

8.根據權利要求6所述檢測試劑盒，其特征在于，步驟（2）中高碘酸鈉:抗脂蛋白磷脂酶A2抗體=1:2（重量）。

9.根據權利要求6所述檢測試劑盒，其特征在于，步驟（3）中抗脂蛋白磷脂酶A2抗體：激活的聚苯乙烯膠乳顆粒=5-20:100（重量），葡萄糖：激活的聚苯乙烯膠乳顆粒=20-50：100（重量）。