[發(fā)明專利]一種輻射誘變邊藝春蘭獲得葉藝新類型的方法

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201610067921.9
• 申請(qǐng)日: 2016-02-01
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN105684892A
• 公開(kāi)（公告）日: 2016-06-22
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 孫葉;包建忠;劉春貴;李風(fēng)童;馬輝;張?zhí)?/a>;曹宏;陳秀蘭
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 江蘇里下河地區(qū)農(nóng)業(yè)科學(xué)研究所
• 主分類號(hào): A01H1/06
• 分類號(hào): A01H1/06;A01G1/00;A01N47/44;A01N37/34;A01P1/00;A01P3/00
• 代理公司: 揚(yáng)州市錦江專利事務(wù)所 32106
• 代理人: 江平

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于輻射花卉育種技術(shù)領(lǐng)域。

背景技術(shù)

“葉藝”性狀能極大地提高蘭花的觀賞性，“葉藝蘭”在東南亞市場(chǎng)十分受歡迎。中國(guó)蘭（春蘭、蕙蘭、建蘭、墨蘭、寒蘭等）的“葉藝”以金色、黃色、黃綠色、乳白色和白色為多見(jiàn)，有透明、半透明、不透明之分，色斑的形態(tài)、位置多種多樣。中國(guó)蘭中“葉藝”品種最多的是臺(tái)灣的垂葉墨蘭，僅“達(dá)摩”的芽變種，現(xiàn)已有綠葉品、中斑藝、爪藝、寶藝、中透藝、鶴藝等20～30種葉藝類型。

日本春蘭的葉藝類型也十分豐富，目前市場(chǎng)上出現(xiàn)的葉藝春蘭主要為日本春蘭，我國(guó)傳統(tǒng)春蘭品種的選育注重瓣型，“葉藝”品種十分稀少，“葉藝”類型也很少，主要為邊藝。春蘭“葉藝”品種主要從野生種中篩選，到目前為止，還未有人工選育出春蘭“葉藝”品種的報(bào)道。

輻射誘變育種是園藝新品種選育常用的方法，目前通過(guò)⁶⁰Co-γ射線輻射誘變選育中國(guó)蘭突變體研究，在國(guó)內(nèi)已取得了一定進(jìn)展，但通過(guò)輻射誘變春蘭邊藝品種選育葉藝新類型，這在以往的研究文獻(xiàn)中還未發(fā)現(xiàn)類似的報(bào)道。

發(fā)明內(nèi)容

發(fā)明目的在于克服春蘭葉藝品種依靠從野生種中篩選的現(xiàn)狀，提供一種高效、系統(tǒng)選育邊藝春蘭葉藝新類型的方法。

本發(fā)明通過(guò)以下步驟實(shí)現(xiàn)：

1）于氣溫為0℃～10℃時(shí)節(jié)，選擇生長(zhǎng)健壯、葉芽大小為2～5mm的邊藝春蘭綠色植株在20℃～25℃控溫日光溫室內(nèi)培養(yǎng)一周。

氣溫為0℃～10℃時(shí)，葉芽開(kāi)始萌發(fā)，葉芽大小2～5mm左右，此狀態(tài)的葉芽輻射誘變效果好，變異的葉藝性狀穩(wěn)定、類型豐富。選擇材料為邊藝春蘭品種，是因?yàn)橛羞吽囆誀畹拇禾m經(jīng)過(guò)輻照誘變后才出現(xiàn)葉藝類型的高效突變，根據(jù)試驗(yàn)輻照劑量為5Gy，新苗葉藝變異率達(dá)70.95%；輻射劑量為10Gy，新苗葉藝變異率達(dá)33.07%。

因?yàn)榇禾m在此季節(jié)葉芽雖然開(kāi)始萌發(fā)但溫度比較低，細(xì)胞生長(zhǎng)分化的速度相對(duì)較緩慢，但在20℃～25℃的溫度下能促進(jìn)葉芽的萌動(dòng)生長(zhǎng)，細(xì)胞的分化發(fā)育狀況好，輻射誘變效果好。

2）脫盆，抖落盆土，不碰傷小芽，將相連的3～5苗分成一簇，農(nóng)用鏈霉素600-800倍液浸泡2小時(shí)后，取出各簇植株材料陰干至輕微脫水。由于本發(fā)明主要變異器官為葉芽，因此輻照前要保護(hù)好小芽，相連3～5苗分成一簇既保證了小苗的存活率，又提高了小苗葉芽的變異率；真菌性殺菌劑與細(xì)菌性殺菌劑的混合液對(duì)植株的細(xì)菌性病害和真菌性病害進(jìn)行預(yù)防,撈出后白菌清使植株均勻涂裹一層保護(hù)膜，能在輻照過(guò)程中更好的保護(hù)植株和葉芽被真菌、細(xì)菌等感染；陰干稍脫水能使植株根莖更柔韌，提高植株輻照后的成活率和生長(zhǎng)勢(shì)。

3）以5Gy～10Gy的劑量，對(duì)植株材料進(jìn)行⁶⁰Co-γ輻照；輻照劑量小于5Gy，植株新苗葉藝不明顯，輻照劑量大于10Gy，植株成活率低，葉芽停止發(fā)育，死亡率高。

4）取輻照后的植株材料進(jìn)行栽培，每簇一盆，使用小號(hào)松鱗為栽培基質(zhì)，上盆后澆透水；使用小號(hào)松鱗是因?yàn)樵摶|(zhì)保水性和透水性好，植株材料成活率最高。

5）栽培第二天扒開(kāi)植株材料假鱗莖周?chē)幕|(zhì)，將用直徑0.5-1cm、厚1mm浸透6-BA的脫脂棉貼于葉芽上，重新蓋上栽培基質(zhì)，在均溫20℃～25℃控溫日光溫室內(nèi)培養(yǎng)一周；為保證6-BA的濃度，采用浸透6-BA的脫脂棉貼于葉芽上，該措施能促進(jìn)葉芽的成苗率，脫脂棉過(guò)大過(guò)潮會(huì)加大新芽的壞死率，過(guò)小過(guò)干達(dá)不到對(duì)葉芽長(zhǎng)效刺激，6-BA濃度5ppm，是促進(jìn)葉芽成苗率的最適濃度。在均溫20℃～25℃控溫日光溫室培養(yǎng)一周能促進(jìn)輻照后材料生長(zhǎng)勢(shì)的恢復(fù)。

6）將植株材料移至陽(yáng)光溫室，每周澆水1～2次，澆水5～6次后取出脫脂棉，正常培養(yǎng)；取出脫脂棉，6-BA的作用已完成，取出后葉芽周?chē)笟猓m宜生長(zhǎng)。

7）利用ISSR技術(shù)對(duì)蘭花輻射誘變苗的遺傳變異進(jìn)行分析，比較突變體與原品種譜帶，兩者有差異，推測(cè)誘變苗是由基因突變引起，變異類型可穩(wěn)定遺傳；

新葉藝的選育主要看無(wú)性繁殖的植株表型性狀是否穩(wěn)定，性狀穩(wěn)定便可以作為新品系，本發(fā)明利用ISSR技術(shù)對(duì)蘭花輻射誘變苗的遺傳變異進(jìn)行分析主要是為了從分子學(xué)角度證明春蘭⁶⁰Co-γ輻射誘變產(chǎn)生的葉藝是可以穩(wěn)定遺傳的，使本發(fā)明跟有理論基礎(chǔ)，無(wú)性繁殖的變異株不用每個(gè)植株進(jìn)行ISSR技術(shù)分析。

8）取變異的葉藝新類型植株通過(guò)無(wú)性繁殖性狀穩(wěn)定后，改用硬質(zhì)料栽培。更有利于葉藝性狀的穩(wěn)定表達(dá)。

本發(fā)明所具有的優(yōu)點(diǎn)和效果：