[發明專利]多棘海盤車酶解多肽及其作為ACE抑制劑的應用

在審

• 申請號: 201610067897.9
• 申請日: 2016-02-01
• 公開（公告）號: CN105779537A
• 公開（公告）日: 2016-07-20
• 發明（設計）人: 李敏晶;譚成玉;孔亮;王迪;王旭瑩
• 申請（專利權）人: 大連海洋大學;李敏晶
• 主分類號: C12P21/06
• 分類號: C12P21/06;A61K38/01;A61P9/12;A23L33/18
• 代理公司: 大連非凡專利事務所 21220
• 代理人: 高學剛

技術領域

本發明涉及一種多棘海盤車酶解多肽，以及該多棘海盤車酶解多肽作為ACE抑制劑的具體應用。

背景技術

多棘海盤車(Asteriasamurensis)，呈五角星狀，直徑14cm左右，體扁，呈黃色或淺褐色，背面稍隆，口面很平，是我國黃海沿岸一種極為普遍的海星。它屬于海洋無脊椎動物，棘皮動物門、海星綱，海盤車科，是已知的一種可以食用的海星。多棘海盤車于我國渤海、黃海海域分布廣泛，現今已經從多棘海盤車中提取到很多種甾體皂苷、甾醇、多糖、神經酰胺與腦苷脂等成分。多棘海盤車在中國黃渤海沿海居民中有長期食用的歷史，其可食部為生殖腺，成份研究表明其富含維生素、微量元素、脂肪等，且含有豐富的不飽和脂肪酸。可用作高營養、無毒的新型海洋食品原料。

高血壓是較為常見的慢性病，也是心腦血管病最主要的影響因素，它能引起心肌梗塞、心力衰竭以及慢性腎臟病等并發癥，潛在的危害性大。近年來，隨著人們生活水平的提高，高血壓的發病率也呈上升趨勢，嚴重威脅著人類健康。血管緊張素轉化酶(angiotensinconvertingenzyme，ACE)是一種二肽酶，它在腎素-血管緊張素系統中對哺乳動物的血壓調節具有重要作用，它能夠將血管緊張素Ⅰ轉化為具有強烈收縮血管作用的血管緊張素Ⅱ，還能夠催化有促血管舒張作用的緩激肽水解，因此具有ACE抑制活性的物質具有顯著地降血壓效果。當前人為合成的降壓藥物（如卡托普利）長期服用往往會產生不同程度的副作用，如心血管疾病、血管性水腫、咳嗽、皮疹等。隨著時代進步，人們越來越重視此類藥物的安全性。因此，篩選對ACE具有強抑制活性的天然降壓活性物質對人類健康具有重要的意義。

發明內容

本發明是為了解決現有技術所存在的上述不足，提出一種多棘海盤車酶解多肽，以及該種酶解多肽作為ACE抑制劑的應用。

本發明的技術解決方案是：一種多棘海盤車酶解多肽，其特征在于：所述的多棘海盤車酶解多肽按照以下步驟制備而得：

將整只多棘海盤車放入干燥箱，65℃條件下烘干并粉碎，過20目篩，將多棘海盤車粉末按照固液比為1：20g/ml的比例與蒸餾水混合，并向其中加入蛋白酶，所加入蛋白酶為多棘海盤車質量的5%，攪拌均勻后，在恒溫水浴鍋內酶解8小時，獲得多棘海盤車酶解液，將多棘海盤車酶解液沸水浴10min，冷卻后進行離心處理，離心條件：4000r/min，離心15min，然后取上清液，透析，濃縮，冷凍干燥，獲得多棘海盤車酶解多肽。

所述的多棘海盤車酶解多肽按照以下步驟制備而得：

將整只多棘海盤車放入干燥箱，65℃條件下烘干并粉碎，過20目篩，將多棘海盤車粉末按照固液比為1：20g/ml的比例與蒸餾水混合，并向其中加入胃蛋白酶，所加入胃蛋白酶為多棘海盤車質量的5%，攪拌均勻后，用濃鹽酸調節pH=2.0，然后在37℃的條件下于恒溫水浴鍋內酶解8小時，獲得多棘海盤車酶解液，將多棘海盤車酶解液沸水浴10min，冷卻后進行離心處理，離心條件：4000r/min，離心15min，然后取上清液，透析，濃縮，冷凍干燥，獲得多棘海盤車酶解多肽。

所述的多棘海盤車酶解多肽按照以下步驟制備而得：

將整只多棘海盤車放入干燥箱，65℃條件下烘干并粉碎，過20目篩，將多棘海盤車粉末按照固液比為1：20g/ml的比例與蒸餾水混合，并向其中加入木瓜蛋白酶，所加入木瓜蛋白酶為多棘海盤車質量的5%，攪拌均勻后，用濃鹽酸調節pH=6.5，然后在60℃的條件下于恒溫水浴鍋內酶解8小時，獲得多棘海盤車酶解液，將多棘海盤車酶解液沸水浴10min，冷卻后進行離心處理，離心條件：4000r/min，離心15min，然后取上清液，透析，濃縮，冷凍干燥，獲得多棘海盤車酶解多肽。

所述的多棘海盤車酶解多肽按照以下步驟制備而得：

將整只多棘海盤車放入干燥箱，65℃條件下烘干并粉碎，過20目篩，將多棘海盤車粉末按照固液比為1：20g/ml的比例與蒸餾水混合，并向其中加入堿性蛋白酶，所加入堿性蛋白酶為多棘海盤車質量的5%，攪拌均勻后，用氫氧化鈉調節pH=12.0，然后在50℃的條件下于恒溫水浴鍋內酶解8小時，獲得多棘海盤車酶解液，將多棘海盤車酶解液沸水浴10min，冷卻后進行離心處理，離心條件：4000r/min，離心15min，然后取上清液，透析，濃縮，冷凍干燥，獲得多棘海盤車酶解多肽。

一種如上所述的多棘海盤車酶解多肽作為ACE抑制劑的應用。

本發明同現有技術相比，具有如下優點：