[發(fā)明專利]長(zhǎng)鏈非編碼RNA LOC284454的應(yīng)用方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201610067499.7
• 申請(qǐng)日: 2016-01-29
• 公開（公告）號(hào): CN105506158B
• 公開（公告）日: 2019-09-27
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 曾朝陽(yáng);龔朝建;張姍姍;熊煒;李桂源;李小玲;王裕民;張雪瑩;李雨薇;薛丹;潘序雅;鄺彪
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 中南大學(xué)
• 主分類號(hào): C12Q1/6886
• 分類號(hào): C12Q1/6886
• 代理公司: 長(zhǎng)沙市融智專利事務(wù)所(普通合伙) 43114
• 代理人: 袁靖

本發(fā)明公開了檢測(cè)卵巢癌組織中長(zhǎng)鏈非編碼RNA LOC284454表達(dá)量的試劑的應(yīng)用，主要是用于制備卵巢癌輔助診斷或者療效預(yù)測(cè)的實(shí)時(shí)熒光定量檢測(cè)試劑。通過(guò)研究證實(shí)LOC284454在卵巢癌組織中表達(dá)上調(diào)，高表達(dá)LOC284454的卵巢癌患者比低表達(dá)LOC284454的卵巢癌患者預(yù)后差，因此，將LOC284454的表達(dá)用于卵巢癌患者的預(yù)后預(yù)測(cè)，可以為卵巢癌患者的預(yù)后提供強(qiáng)有力的分子生物學(xué)依據(jù)，具有深遠(yuǎn)的臨床意義和重要的推廣應(yīng)用前景。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于腫瘤分子生物學(xué)領(lǐng)域，具體涉及檢測(cè)卵巢癌組織中長(zhǎng)鏈非編碼RNALOC284454表達(dá)量的試劑用于制備卵巢癌輔助診斷或者療效預(yù)測(cè)制劑的用途。

背景技術(shù)

人類基因組計(jì)劃及其后續(xù)的DNA元件百科全書計(jì)劃(The Encyclopedia of DNAElements Project,ENCODE)研究成果表明，蛋白編碼基因序列僅占人類基因組序列的1-3％，而人基因組中絕大部分可轉(zhuǎn)錄的序列為長(zhǎng)鏈非編碼RNA(Long non-coding RNA,lncRNA)。LncRNA廣泛地存在于各種生物中，且隨著生物復(fù)雜程度的升高，基因組中l(wèi)ncRNA序列的比例也相應(yīng)地增大，提示lncRNA在生物進(jìn)化過(guò)程中有重要意義。隨著lncRNA不斷被發(fā)現(xiàn)，它們的功能逐漸被詮釋，科學(xué)家們發(fā)現(xiàn)lncRNA廣泛而活躍地參與到生命活動(dòng)不同層面的功能調(diào)控中，作為一個(gè)嶄新的領(lǐng)域，已經(jīng)成為國(guó)際生命科學(xué)研究領(lǐng)域新的前沿與熱點(diǎn)。

LncRNA可作為功能蛋白質(zhì)的信號(hào)(signal)、誘導(dǎo)(guide)、誘餌(decoy)或支架(scaffold)分子等多種方式，在染色質(zhì)重構(gòu)、基因轉(zhuǎn)錄、翻譯及蛋白修飾等多重水平調(diào)控基因的表達(dá)，并在包括發(fā)育、免疫、生殖等基本生理過(guò)程中扮演了不可替代的角色，更重要的是，lncRNA的表達(dá)與功能失調(diào)已經(jīng)與包括惡性腫瘤在內(nèi)的人類多種疾病緊密聯(lián)系在了一起。因此，深入研究lncRNA的功能，揭示由lncRNA介導(dǎo)的遺傳信息傳遞方式和表達(dá)調(diào)控網(wǎng)絡(luò)，不僅可以從蛋白編碼基因以外的角度重新注釋和闡明基因組的結(jié)構(gòu)與功能，深入發(fā)現(xiàn)生命活動(dòng)的本質(zhì)和規(guī)律，還有望從一個(gè)新的視角認(rèn)識(shí)包括腫瘤在內(nèi)的多種人類常見疾病的發(fā)病機(jī)理，并為這些疾病的診斷與治療提供新的分子標(biāo)志物與治療靶點(diǎn)。

卵巢癌即卵巢惡性腫瘤，是女性生殖器官常見的惡性腫瘤之一，發(fā)病率僅次于子宮頸癌和子宮體癌而列居第三位。但卵巢上皮癌死亡率卻占各類婦科腫瘤的首位，對(duì)婦女生命造成嚴(yán)重威脅。由于卵巢的胚胎發(fā)育、組織解剖及內(nèi)分泌功能較復(fù)雜，早期癥狀不典型，術(shù)前鑒別卵巢腫瘤的組織類型及良惡性相當(dāng)困難。腫瘤的發(fā)生發(fā)展是多基因參與、多步驟、多階段的復(fù)雜過(guò)程，LncRNA在卵巢癌的發(fā)生發(fā)展過(guò)程中可能也起到了重要的作用。最近我們?cè)诼殉舶┲邪l(fā)現(xiàn)lncRNA LOC284454(NCBI accession number:NR_036515)在卵巢癌中表達(dá)顯著上調(diào)，LOC284454表達(dá)高的患者更容易發(fā)生轉(zhuǎn)移，其生存時(shí)間短于該lncRNA表達(dá)低的患者，因此針對(duì)該lncRNA的檢測(cè)制劑也可以用于卵巢癌的預(yù)后判斷。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的是提供檢測(cè)卵巢癌組織中長(zhǎng)鏈非編碼RNA LOC284454表達(dá)量的試劑用于制備卵巢癌輔助診斷或者療效預(yù)測(cè)制劑的用途。

檢測(cè)卵巢癌組織中長(zhǎng)鏈非編碼RNA LOC284454表達(dá)量的試劑的應(yīng)用，所述的試劑用于制備卵巢癌輔助診斷或者療效預(yù)測(cè)制劑；該長(zhǎng)鏈非編碼RNA LOC284454的序列如SEQNO:1所示。

所述的卵巢癌輔助診斷或者療效預(yù)測(cè)制劑為實(shí)時(shí)熒光定量檢測(cè)試劑。

所述的實(shí)時(shí)熒光定量檢測(cè)試劑中包含用于實(shí)時(shí)熒光定量檢測(cè)LOC284454表達(dá)的引物序列：

正向引物：5’-TGAAATCAGATGGGAGGAGGC-3’，

反向引物：5’-AGACATGACACACAGCACGA-3’。

所述的實(shí)時(shí)熒光定量檢測(cè)試劑中包含內(nèi)參基因GAPDH特異性PCR引物：