[發(fā)明專利]一種濁度法抗生素效價測定儀的吸光度質(zhì)量測量方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201610066314.0
• 申請日: 2016-01-29
• 公開（公告）號: CN105606551B
• 公開（公告）日: 2018-03-27
• 發(fā)明（設計）人: 丁峰元;朱茜;趙迎晨;毛森;雷軍鋒
• 申請（專利權）人: 河南省計量科學研究院
• 主分類號: G01N21/31
• 分類號: G01N21/31
• 代理公司: 鄭州天陽專利事務所(普通合伙)41113
• 代理人: 聶孟民

1.一種濁度法抗生素效價測定儀的吸光度質(zhì)量測量方法，其特征在于，由以下步驟實現(xiàn)：

（1）、選擇濾光片：

首先選擇4種中性灰色玻璃制成濾光片，玻璃牌號分別為 ZAB50、ZAB30、ZAB20、ZAB10，對應的吸光度牌號分別為0.3、0.5、0.7、1.0，每種濾光片長均為56-60 mm、寬均為16-20 mm、厚均為1.8-2.2 mm，透射比正反面差值≤0.001，透射比均勻性≤0.001；

（2）、組裝光譜中性濾光片：

將4種中性灰色玻璃制成的濾光片分別裝在濾光片支架上，濾光片支架為鋁制、表面發(fā)黑，支架尺寸大小與濁度法抗生素效價測定儀的比色皿相同，支架上有開孔，確保濁度法抗生素效價測定儀發(fā)出的光完全通過支架，將4種不同的濾光片分別平放于4個支架的開孔處，用不擋光的彈簧片固定濾光片，組裝成4種光譜中性濾光片；

（3）、測量光譜中性濾光片吸光度標準值：

用分光光度計對4種光譜中性濾光片分別在530 nm和580 nm進行吸光度值測量，在530 nm的測量值為該光譜中性濾光片530 nm吸光度標準值，在580 nm的測量值為該光譜中性濾光片580 nm吸光度標準值；

（4）、組配光譜中性濾光片：

每個光譜中性濾光片組包含8片光譜中性濾光片：吸光度牌號為0.3的ZAB50中性灰色玻璃濾光片、吸光度牌號為0.7的ZAB20中性灰色玻璃濾光片、吸光度牌號為1.0的ZAB10中性灰色玻璃濾光片各1片，吸光度牌號為0.5的ZAB30中性灰色玻璃濾光片5片，吸光度牌號為0.3的ZAB50中性灰色玻璃濾光片、吸光度牌號為0.5的ZAB30中性灰色玻璃濾光片、吸光度牌號為0.7的ZAB20中性灰色玻璃濾光片、吸光度牌號為1.0的ZAB10中性灰色玻璃濾光片各1片，用于濁度法抗生素效價測定儀吸光度示值誤差的測量；吸光度牌號為0.5的ZAB30中性灰色玻璃濾光片5片，用于濁度法抗生素效價測定儀通道間吸光度差異的測量；

（5）、抗生素效價測定儀吸光度示值誤差測量：

將吸光度牌號為0.3的ZAB50中性灰色玻璃濾光片、吸光度牌號為0.5的ZAB30中性灰色玻璃濾光片、吸光度牌號為0.7的ZAB20中性灰色玻璃濾光片、吸光度牌號為1.0的ZAB10中性灰色玻璃濾光片的4片光譜中性濾光片分別垂直置于濁度法抗生素效價測定儀樣品槽中進行測量，4片光譜中性濾光片吸光度測量值與標準值之差的最大值為濁度法抗生素效價測定儀吸光度示值誤差，吸光度示值誤差≤0.03；

（6）、抗生素效價測定儀通道間吸光度差異測量：

將5片吸光度牌號為0.5的ZAB30中性灰色玻璃濾光片分別垂直置于濁度法抗生素效價測定儀各通道樣品槽中進行測量，5片光譜中性濾光片在各通道吸光度測量值的最大值與最小值之差為通道間吸光度差異，通道間吸光度差異≤0.03。

2.根據(jù)權利要求1所述的濁度法抗生素效價測定儀的吸光度質(zhì)量測量方法，其特征在于，所述的濾光片支架是由鋁制的架體（6）構成，架體（6）上部兩側有用于將濾光片支架懸掛在濁度法抗生素效價測定儀的培養(yǎng)架上的凸頭（1），架體內(nèi)有用于平放濾光片的長形凹槽（2），凹槽中間設有正方形的開孔（3），凹槽（2）上部的架體上有彈簧片固定孔（4），彈簧片底端有開口（5），彈簧片（7）上部有與彈簧片固定孔（4）相對應的固定孔（9），下部開有與開孔（3）相一致對應的槽孔（8），濾光片平放于凹槽（2）中，彈簧片（7）壓在濾光片上面，彈簧片經(jīng)固定孔（9）、彈簧片固定孔（4）由螺釘將彈簧片固定在凹槽（2）上，使濾光片組裝在支架上，構成一片光譜中性濾光片結構。

3.根據(jù)權利要求1所述的濁度法抗生素效價測定儀的吸光度質(zhì)量測量方法，其特征在于，由以下步驟實現(xiàn)：

（1）濾光片選擇：

濾光片為4種中性灰色玻璃，玻璃牌號分別為 ZAB50、ZAB30、ZAB20、ZAB10，對應的吸光度牌號分別為0.3、0.5、0.7、1.0，每種濾光片均為厚2 mm、長58 mm、寬18 mm；

用符合《紫外、可見、近紅外分光光度計國家計量檢定規(guī)程》I級要求的分光光度計對每片濾光片分別在530 nm和580 nm的透射比正反面差值、透射比均勻性進行測量；

先將分光光度計測量波長設為530 nm，光譜帶寬2 nm，以空氣做參比，將分光光度計校零，使其透射比為1.000，將1片濾光片放置于光路上，與光路垂直，光路經(jīng)過濾光片正面中心點位置，讀出透射比值，連續(xù)測量3次取平均值，即為該濾光片530 nm的正面透射比值，再將光路經(jīng)過濾光片反面中心點位置，讀出透射比值，連續(xù)測量3次取平均值，即為該濾光片530 nm的反面透射比值，該濾光片530 nm的正面透射比值與反面透射比值之差的絕對值為該濾光片在530 nm的透射比正反面差值，將分光光度計測量波長設為580 nm進行測量，計算該濾光片在580 nm的透射比正反面差值，每片濾光片在530 nm和580 nm的透射比正反面差值均≤0.001；

按照以上步驟，分別在每片濾光片中心點位置的上、下各20 mm處進行530 nm和580nm的正、反面透射比值測量；波長530 nm時，濾光片在上、中、下3位置透射比測量值之差的絕對值的最大值為該濾光片在530 nm透射比均勻性；波長580 nm時，濾光片在上、中、下3位置透射比測量值之差的絕對值的最大值為該濾光片在580 nm透射比均勻性，每片濾光片在530 nm和580 nm透射比均勻性均≤0.001；

（2）光譜中性濾光片組裝：

制作濾光片支架，為表面發(fā)黑處理的鋁制支架，架體長22 mm，寬22 mm，高96 mm，距支架上端下方12 mm處有寬3 mm的凸頭（1），用于將濾光片支架懸掛在濁度法抗生素效價測定儀的培養(yǎng)架上，支架內(nèi)有長58 mm，寬18 mm，深11 mm的長形凹槽（2），用于平放濾光片，凹槽上有長52 mm，寬14 mm，兩端為半圓，中間為正方形的開孔（3）；

彈簧片的外觀尺寸為長54.5 mm，寬17 mm，厚0.5 mm，槽孔為長34 mm，寬14 mm，頂端為半圓，底端有正方形的開口（5）；

將1片濾光片平放于1個支架中的凹槽（2）中，彈簧片平放在濾光片上，在支架的彈簧片固定孔（4）處用螺絲將彈簧片緊固，使濾光片固定在支架上，組裝成1片光譜中性濾光片；

（3）、光譜中性濾光片吸光度標準值測量：

用符合《紫外、可見、近紅外分光光度計國家計量檢定規(guī)程》I級要求的分光光度計對每片光譜中性濾光片分別在530 nm和580 nm的吸光度標準值進行測量；

調(diào)整分光光度計測量波長為530 nm，光譜帶寬2 nm，以空氣做參比，將分光光度計校零，使其吸光度為0.000，將1片光譜中性濾光片放置于分光光度計的光路上，與光路垂直，光路經(jīng)過光譜中性濾光片正面中心點位置，讀出吸光度值，連續(xù)測量3次取平均值，即為該光譜中性濾光片530 nm的正面吸光度值；再將光路經(jīng)過光譜中性濾光片反面中心點位置，讀出吸光度值，連續(xù)測量3次取平均值，即為該光譜中性濾光片530 nm的反面吸光度值；該光譜中性濾光片的530 nm的正面吸光度值與反面吸光度值的平均值為該光譜中性濾光片在530 nm的吸光度標準值，將分光光度計測量波長設為580 nm進行以上測量，計算該光譜中性濾光片在580 nm的吸光度標準值；

（4）、光譜中性濾光片組配：

每組光譜中性濾光片包含8片光譜中性濾光片，其中吸光度牌號為0.3、0.7、1.0的濾光片各1片，吸光度牌號為0.5的濾光片5片，吸光度牌號為0.3、0.5、0.7、1.0的各1片光譜中性濾光片用于濁度法抗生素效價測定儀吸光度的示值誤差測量，吸光度牌號為0.5的5片光譜中性濾光片在530 nm吸光度標準值的差值應≤ 0.003，在580 nm吸光度標準值的差值≤ 0.003，用于濁度法抗生素效價測定儀通道間吸光度差異的測量；

（5）、儀器吸光度示值誤差測量：

將濁度法抗生素效價測定儀在無遮擋光路條件下，以空氣為參比，將吸光度牌號為0.3、0.5、0.7、1.0的4片光譜中性濾光片分別垂直置于濁度法抗生素效價測定儀樣品槽中，每片濾光片連續(xù)測量吸光度3次取平均值為該濾光片吸光度測量值，4片光譜中性濾光片吸光度測量值與標準值之差的最大值為該濁度法抗生素效價測定儀的吸光度示值誤差，吸光度示值誤差≤0.03；

（6）、儀器通道間吸光度差異測量：

將濁度法抗生素效價測定儀在無遮擋光路條件下，以空氣為參比，將吸光度牌號為0.5的5片光譜中性濾光片分別垂直置于濁度法抗生素效價測定儀各通道樣品槽中，每個通道連續(xù)測量吸光度3次取平均值作為該通道吸光度測量值，各通道吸光度測量值的最大值與最小值之差為該濁度法抗生素效價測定儀的通道間吸光度差異，通道間吸光度差異≤0.03。