[發(fā)明專利]一種檢測過氧化氫的熒光探針及其制備方法和應用

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201610066123.4
• 申請日: 2016-01-29
• 公開（公告）號: CN105647518B
• 公開（公告）日: 2017-09-12
• 發(fā)明（設計）人: 唐波;楊秀娥;解希雷;王栩;吳田宏;焦曉云;李勇
• 申請（專利權）人: 山東師范大學
• 主分類號: C07D405/06
• 分類號: C07D405/06;C09K11/06;C09B23/10;G01N21/64
• 代理公司: 濟南圣達知識產權代理有限公司37221
• 代理人: 趙妍

技術領域

本發(fā)明涉及一種熒光探針，特別涉及一種新響應基團、選擇性好的近紅外染料熒光探針，其合成方法及其在檢測細胞內過氧化氫的應用，屬于檢測技術領域。

背景技術

細胞內絕大部分過氧化氫是由線粒體呼吸鏈產生，首先氧氣(O₂)被還原生成O₂^·，隨后O₂^·經超氧化物歧化酶(SODs)的歧化作用轉變成過氧化氫。

在生物體中，過氧化氫是一種主要的活性氧，在細胞信號傳導過程中扮演重要的角色。過氧化氫不僅能產生其他活性氧，而且是其他活性氧發(fā)生氧化反應時的產物。細胞受到刺激會產生活性氧爆發(fā)，這會影響到幾類能調控細胞增殖和凋亡的信號蛋白，例如激活細胞有絲分裂的蛋白激酶家族(MAP)、轉綠因子1(AP-1)、蛋白質絡氨酸磷酸酶(pTps)、離子通道和G蛋白。過氧化氫在細胞中的生物化學作用非常復雜，現在普遍認為過氧化氫是細胞信號傳導的第二信使分子，細胞內ROS尤其是過氧化氫含量的相對穩(wěn)定是維持細胞活性所必需的，因此過氧化氫在信號通路中起著非常重要的作用。

許多與人類衰老相關的疾病，比如癌癥、心血管疾病、神經退行性疾病均與氧化應激有關，氧化應激是活性氧不受調控過量產生的結果，而細胞內氧化還原化學反應的紊亂會進一步損害組織和器官。在機體中，過氧化氫是一種主要的氧代謝產物，也是氧化應激的標志物。因此，準確檢測細胞內過氧化氫的含量是非常重要的。

目前，過氧化氫的檢測技術有熒光法、電化學法、生物發(fā)光法、化學發(fā)光法等。熒光法由于其操作簡單、靈敏度高等優(yōu)點受到了越來越多的關注。

近年來，用于檢測過氧化氫的大多數探針是以硼酸(Naama Karton-Lifshin,Ehud Segal,Liora Omer,Moshe Portnoy,Ronit Satchi-Fainaro,and Doron Shaba,J.Am.Chem.Soc.,2011,133,10960–10965；Lin Yuan,Weiying Lin,Sheng Zhao,Wensha Gao,Bin Chen,Longwei He,and Sasa Zhu,J.Am.Chem.Soc.,2012,134,13510-13523)或硼酸酯(Duangkhae Srikun,Evan W.Miller,Dylan W.Domaille,and Christopher J.Chang,J.Am.Chem.Soc.,2008,130,4596-4597；Dickinson,B.C.；Huynh,C.；Chang,C.J.,J.Am.Chem.Soc.,2010,132,5906)作為過氧化氫的響應基團，但是已有文章(Thomas F.Brewer,Francisco J.Garcia,Carl S.Onak,Kate S.Carroll,and Christopher J.Chang,Annu.Rev.Biochem.,2015,84:765-790.)報道，ONOO^-會對這類響應基團造成干擾，另外近幾年發(fā)表的幾篇文章(Sikora A,Zielonka J,Lopez M,Joseph J,Kalyanaraman B,Free Radic.Biol.Med.,2009,47:1401–7；Zielonka J,Sikora A,Hardy M,Joseph J,Dranka BP,Kalyanaraman B.,Chem.Res.Toxicol.,2012,25:1793–99；Ji Zhou,Yang Li,Jiaoning Shen,Qiang Li,Rui Wang,Yufang Xuand Xuhong Qian,RSC Adv.,2014,4,51589–51592)中詳細的介紹了以硼酸或硼酸酯作為響應基團的探針也能與ONOO^-、ClO^-發(fā)生反應并引起探針熒光的變化，而且與ONOO^-的反應速度要遠遠快于與過氧化氫反應的速度。因此，以硼酸或硼酸酯作為響應基團的探針對過氧化氫的選擇性尚待提高。