[發明專利]一種黑痣菌子囊果提取基因組DNA的方法有效
| 申請號： | 201610065875.9 | 申請日： | 2016-01-29 |
| 公開（公告）號： | CN105586334B | 公開（公告）日： | 2019-05-17 |
| 發明（設計）人： | 李曉玲;李成云;劉林;楊靜;鄢進陸;彭莞云;楊亞瓊;劉立娜;王慧;王一;王春梅;楊雅婷 | 申請（專利權）人： | 云南農業大學 |
| 主分類號： | C12N15/10 | 分類號： | C12N15/10 |
| 代理公司： | 北京華仲龍騰專利代理事務所(普通合伙) 11548 | 代理人： | 李靜 |
| 地址： | 650000 云南省*** | 國省代碼： | 云南;53 |
| 權利要求書： | 查看更多 | 說明書： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 黑痣 菌子 提取 基因組 dna 方法 | ||
1.一種黑痣菌子囊果提取基因組DNA的方法，其特征在于，包括以下步驟：
(1)用鋒利的刀片將去10-15個子囊果從寄主植物上取下，盡量不帶寄主組織，置于離心管內，加少量的二氧化硅和液氮迅速研磨成粉末狀；
(2)加入800ul的CTAB-free緩沖液并迅速混勻，置于冰上10min；4℃，9000r/min離心5min，棄上清，步驟(2)重復兩次；
(3)加入750ul,65℃預熱的CTAB提取緩沖液，充分混勻后置于65℃水浴中1h；
(4)將溫浴的材料取出置于室溫下，待冷卻至室溫后加入750μl的苯酚-氯仿-異戊醇混合液，比例為25:24:1，搖勻3～5min，12000rmp室溫離心10min；
(5)將上清液轉移至一新的1.5ml的離心管中，再加入等體積的氯仿-異戊醇500-550μl混合液，搖勻3～5min，12000rmp，室溫離心10min；
(6)將上清液轉移至一新的1.5ml的離心管中，加入350μl的經-20℃預冷的異丙醇，沉降DNA，充分混勻后，于-20℃冰箱中靜置保存30min；
(7)將冷凍保存的離心管取出后置于室溫中，待溫度至室溫后12000rmp室溫離心10min，可見底部沉降DNA；
(8)棄去上清液，用500μl的70％的乙醇沖洗1-2次，每次12000rmp室溫離心1min后棄上清液，干燥后加入滅菌的蒸餾水；
(9)置于-20℃冰箱中保存備用。
該專利技術資料僅供研究查看技術是否侵權等信息，商用須獲得專利權人授權。該專利全部權利屬于云南農業大學，未經云南農業大學許可，擅自商用是侵權行為。如果您想購買此專利、獲得商業授權和技術合作，請聯系【客服】
本文鏈接：http://www.szxzyx.cn/pat/books/201610065875.9/1.html，轉載請聲明來源鉆瓜專利網。
