[發明專利]一種透明質酸?甲基纖維素復合凝膠的活性酯交聯方法

有效

• 申請號: 201610065326.1
• 申請日: 2016-01-29
• 公開（公告）號: CN105504316B
• 公開（公告）日: 2017-12-29
• 發明（設計）人: 蔡強;高琴;卓凡露;胡堃;王穎
• 申請（專利權）人: 清華大學
• 主分類號: C08J3/24
• 分類號: C08J3/24;C08L1/28;C08L5/08;A61L27/48;A61L27/52;A61L27/56;A61L27/58
• 代理公司: 北京眾合誠成知識產權代理有限公司11246
• 代理人: 朱琨

1.一種透明質酸-甲基纖維素復合凝膠的活性酯交聯方法，其特征在于，聚乙二醇琥珀酰亞胺琥珀酸酐和去乙酰化透明質酸反應得到交聯活性酯，所述交聯活性酯與甲基纖維素交聯，形成透明質酸-甲基纖維素復合凝膠。

2.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，具體操作為：

(1)將預先配制好的第一份人工腦脊液加熱至90℃，加入一定量的氯化鈉、磷酸鈉和甲基纖維素，攪拌均勻后再加入等體積的第二份人工腦脊液，-4℃冰鹽浴中攪拌40min，得到甲基纖維素溶液，4℃冷藏過夜；

(2)將聚乙二醇琥珀酰亞胺琥珀酸酐配制成水溶液，加入去乙酰化透明質酸溶液中，攪拌使溶液混合均勻，室溫下反應12h，再向溶液中加入質量分數為95％的乙醇至沉淀產生完全，過濾收集沉淀，用乙醇洗滌沉淀3次以上，真空干燥，得到交聯活性酯；

(3)稱取一定量的交聯活性酯加入甲基纖維素溶液中，調節pH至7.4，攪拌2h以上使交聯活性酯充分分散且溶解均勻，4℃冷藏過夜，并對其冷凍干燥，得到透明質酸-甲基纖維素復合凝膠。

3.根據權利要求2所述的方法，其特征在于，氯化鈉、磷酸鈉、甲基纖維素、去乙酰化透明質酸的質量之比依次為(2～4)：(0～0.05)：7：1。

4.根據權利要求2所述的方法，其特征在于，步驟(2)中，聚乙二醇琥珀酰亞胺琥珀酸酐水溶液的濃度為1×10^-3mol/L，與去乙酰化透明質酸溶液的體積比為1：10。

5.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，所述聚乙二醇琥珀酰亞胺琥珀酸酐的制備方法為：

(1)將分子量為6000的聚乙二醇，溶解于二氧六環中，以吡啶作為催化劑，加入琥珀酸酐，加熱狀態下回流攪拌，反應完畢后冷卻，在快速攪拌下滴加無水乙醚至沉淀不再產生，之后置于冰浴中攪拌，過濾后將沉淀充分溶解于二氯甲烷中，再次滴加無水乙醚至沉淀不再產生，冰浴攪拌，將過濾得到的沉淀真空干燥；

(2)將步驟(1)得到的沉淀與N-羥基琥珀亞酰胺溶于含有二環己基碳化二亞胺的N,N-二甲基甲酰胺中，攪拌12h后，在快速攪拌下滴加無水乙醚至沉淀不再產生，之后置于冰浴中攪拌，過濾后將沉淀充分溶解于二氯甲烷中，再次滴加無水乙醚至沉淀不再產生，冰浴攪拌，過濾，用無水乙醚多次洗滌，將沉淀進行真空干燥，得到所述的聚乙二醇琥珀酰亞胺琥珀酸酐。

6.根據權利要求5所述的方法，其特征在于，聚乙二醇、琥珀酸酐、吡啶、N-羥基琥珀亞酰胺、二環己基碳化二亞胺的摩爾比依次為1：1：0.695：2.453：2.563；聚乙二醇與各溶劑的質量體積比為聚乙二醇：二氧六環：步驟(1)中所用的二氯甲烷：步驟(2)中所用的二氯甲烷：N,N-二甲基甲酰胺＝0.48g：20mL：30mL：30mL：1mL。

7.根據權利要求5所述的方法，其特征在于，步驟(1)中，回流攪拌時的溫度為100℃，攪拌時間為4h；步驟(1)和步驟(2)中，兩次冰浴攪拌的時間均為：首次攪拌30min，第二次攪拌15min。

8.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，所述去乙酰化透明質酸的制備方法為：向透明質酸的水溶液中滴加氫氧化鈉溶液，緩慢攪拌，使透明質酸與氫氧化鈉溶液充分接觸，反應2h，得到去乙酰化透明質酸。

9.根據權利要求8所述的方法，其特征在于，所述透明質酸水溶液的濃度為9.8×10^-3mol/L，氫氧化鈉溶液的濃度為1mol/L；氫氧化鈉溶液的添加量以調節pH值至12.65±0.05為準。

10.權利要求1-9任一項所述方法制備得到的透明質酸-甲基纖維素復合凝膠。