[發(fā)明專利]一種藍(lán)色發(fā)光上轉(zhuǎn)換材料及其制備和應(yīng)用

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 201610061432.2
• 申請日: 2016-01-28
• 公開（公告）號: CN105651989A
• 公開（公告）日: 2016-06-08
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 王碩;生威;胡高爽;張燕;王俊平
• 申請（專利權(quán)）人: 天津科技大學(xué)
• 主分類號: G01N33/533
• 分類號: G01N33/533;G01N33/577
• 代理公司: 北京金智普華知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11401
• 代理人: 李明卓

1.一種藍(lán)色發(fā)光上轉(zhuǎn)換材料，其特征在于，使用醋酸釔C₆H₁₇O₁₀Y，醋酸鐿C₆H₉O₆Yb.4H₂O 和醋酸銩C₆H₉Tm.xH₂O為主要原料制備，得到的上轉(zhuǎn)換材料發(fā)射波長為477nm。

2.一種制備權(quán)利要求1所述藍(lán)色發(fā)光上轉(zhuǎn)換材料的方法，其特征在于，包括如下步驟： 醋酸釔C₆H₁₇O₁₀Y，醋酸鐿C₆H₉O₆Yb.4H₂O和醋酸銩C₆H₉Tm.xH₂O按照79:19:2的摩爾 比例溶解在含有6ml油酸和17ml十八烯的三頸燒瓶中，加熱到100℃抽真空反應(yīng) 10min，之后再加熱到160℃并保持溫度反應(yīng)30min，冷卻至室溫；加入含有0.1gNaOH 和0.148gNH₄F的甲醇溶液，并加熱到80℃，真空干燥30min，在氮氣的保護(hù)下繼續(xù) 加熱到300℃，冷凝回流1h，冷卻至室溫；最后用乙醇-環(huán)己烷將混合液離心清洗三 次，即可得到藍(lán)色發(fā)光油溶性上轉(zhuǎn)換材料OA-UCNPs。

3.一種制備權(quán)利要求1所述藍(lán)色發(fā)光上轉(zhuǎn)換材料的方法，其特征在于，包括如下步驟：

(1)醋酸釔C₆H₁₇O₁₀Y，醋酸鐿C₆H₉O₆Yb.4H₂O和醋酸銩C₆H₉Tm.xH₂O按照70～90: 15～25:1～2的摩爾比例與3～8ml油酸和10～20ml十八烯充分混合，先將混合液加熱到 80～100℃，抽真空反應(yīng)10min以上，再將溶液加熱到120～200℃，并保持溫度反應(yīng) 20min以上，冷卻至室溫；加入含有0.1gNaOH和0.148gNH₄F的甲醇溶液，充分?jǐn)? 拌混勻，除去甲醇溶液再將混合液在惰性氣體保護(hù)下加熱到280～320℃，反應(yīng)1～3h， 冷卻至室溫；最后用有機溶劑清洗三次，即可得到藍(lán)色發(fā)光油溶性上轉(zhuǎn)換納米材料。

(2)0.2～0.5g聚丙烯酸溶解在5～35ml乙二醇中，在氮氣保護(hù)下加熱到110℃，之后注 入步驟(1)制得的10～200mg油溶性上轉(zhuǎn)換材料與1～20ml甲苯的混合液，保持反應(yīng) 0.5～2h；繼續(xù)加熱到200～300℃，反應(yīng)0.5～2h；反應(yīng)結(jié)束加入過量的稀鹽酸，得到白色 粉末，再用超純水清洗，即可獲得水溶性的上轉(zhuǎn)換材料PAA-UCNPs。

4.一種權(quán)利要求3所述方法制備得到的水溶性的上轉(zhuǎn)換材料的應(yīng)用，其特征在于，

采用活化酯的方法將磺胺喹噁啉單克隆抗體連接到水溶性上轉(zhuǎn)換材料上以制備免疫 熒光信號探針，具體方法如下：(1)免疫熒光信號探針：稱取5mgPAA-UCNPs超聲 分散在2ml0.01molL^-1，pH5.5的一水嗎啉乙磺酸溶液，按照摩爾比例1：1.2加入EDC 和NHS，30℃下反應(yīng)2h；用0.01molL^-1，pH7.2的4-羥乙基哌嗪乙磺酸溶液清洗三次， 加入磺胺喹噁啉單克隆抗體反應(yīng)2h，再用BSA溶液封閉2h，即可獲得免疫熒光信號探 針；

(2)免疫感應(yīng)探針制備：向含有5mg核殼式單分散聚苯乙烯磁性微球的PBS溶液 中加入EDC和NHS，室溫下活化2h，PBS清洗三次，加入25μg磺胺喹噁啉包被原， 室溫下反應(yīng)4h。用2％BSA封閉，PBS磁分離清洗三次，得到的復(fù)合物即為免疫感應(yīng)探 針；

(3)免疫熒光信號探針和免疫感應(yīng)探針，建立熒光免疫競爭體系：

取1.5ml的小試管若干個，分別加入100μL的免疫感應(yīng)探針和100μL免疫熒光信號 探針，配制濃度梯度0、0.1、0.5、1、5、10、50、100ngmL^-1的磺胺喹噁啉標(biāo)準(zhǔn)品溶液， 然后依次向每個小試管中加入游離的磺胺喹噁啉標(biāo)準(zhǔn)品溶液，室溫下反應(yīng)1h；反應(yīng)結(jié)束 后，在外加磁場作用下分離結(jié)合產(chǎn)物，并用PBS清洗3次；用600μLPBS復(fù)溶后,放入 到F-4500熒光分光光度計上進(jìn)行熒光測定。