[發明專利]一種四烯雌酮含量的高效液相色譜檢測方法

在審

• 申請號: 201610060735.2
• 申請日: 2016-01-28
• 公開（公告）號: CN105699517A
• 公開（公告）日: 2016-06-22
• 發明（設計）人: 張立會;姜淋潔;王建;程雪嬌;李艷萍;王勇;朱士江;崔志剛;焦曉軍;王猛;甄盼盼;楊雪;李麗琴;王宇鵬;于小婷;余貴菊;范慶增;李玲
• 申請（專利權）人: 天津市中升挑戰生物科技有限公司
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/60;G01N30/74
• 代理公司: 天津濱海科緯知識產權代理有限公司 12211
• 代理人: 李莎

1.一種四烯雌酮含量的高效液相色譜檢測方法，采用如下的色譜條件進行檢測：色 譜柱采用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充物的反相色譜柱，AgilentC18柱；流動相采用乙 腈-0.01％磷酸溶液，其中，乙腈的體積分數為60％-80％，流速0.8-1.2ml/min；柱溫是 20-40℃。

2.根據權利要求1所述的一種四烯雌酮含量的高效液相色譜檢測方法，其特征在于， 色譜柱采用AgilentC18柱(4.6*250mm，5μm)和AgilentC18柱(4.6*150mm，5μm)進行 試驗，優選AgilentC18柱(4.6*250mm，5μm)。

3.根據權利要求1所述的一種四烯雌酮含量的高效液相色譜檢測方法，其特征在于， 流動相中乙腈的體積是70％；流速是1.0ml/min；柱溫為30℃。

4.根據權利要求1所述的一種四烯雌酮含量的高效液相色譜檢測方法，其特征在于， 包括下述步驟：

S1：用乙腈配置已知四烯雌酮含量濃度的標準溶液，并采用如權利要求1所述的色 譜條件進行同一色譜條件下的檢測，計算不同濃度的標準溶液在同一保留時間下的峰面 積，作出獲得峰面積y關于標準溶液濃度x的標準曲線方程y＝f(x)；

S2：將待測樣品經必要處理后獲得待測四烯雌酮樣品溶液，采用同步驟S1的液相色 譜檢測條件，獲得待測四烯雌酮樣品溶液在同一保留時間下的峰面積，并根據步驟S1所 獲得的標準曲線方程y＝f(x)，計算得到待測四烯雌酮樣品溶液的濃度；

S3：根據待測四烯雌酮樣品溶液的濃度獲得待測樣品的四烯雌酮含量數據。

5.根據權利要求4所述的一種四烯雌酮含量的高效液相色譜檢測方法，其特征在于， 所述步驟S1中，標準曲線方程y＝f(x)的標準溶液濃度x在50-1000μg/ml范圍。

6.根據權利要求4所述的一種四烯雌酮含量的高效液相色譜檢測方法，其特征在于， 所述步驟S1中，標準曲線方程y＝f(x)為一元一次方程，相關系數R²≥0.99。

7.根據權利要求4所述的一種四烯雌酮含量的高效液相色譜檢測方法，其特征在于， 所述步驟S2中，對待測樣品的必要處理包括對待測樣品進行一定比例的稀釋，和/或對 樣品進行過濾。