[發明專利]一種修復畜禽消化道損傷的多肽、其生產方法及應用

有效

• 申請號: 201610058932.0
• 申請日: 2016-01-28
• 公開（公告）號: CN105646659B
• 公開（公告）日: 2017-09-29
• 發明（設計）人: 呂志成;楊賽;鮑隆;王長波
• 申請（專利權）人: 山東深海生物科技股份有限公司
• 主分類號: C07K7/06
• 分類號: C07K7/06;C07K7/08;C07K14/00;C07K1/06;C07K1/04;A23K20/147
• 代理公司: 北京元周律知識產權代理有限公司11540
• 代理人: 潘欣欣,徐成福

1.一種多肽，其特征在于，所述多肽為下列多肽中的任意一種：

多肽I：氨基酸序列為Gly-Leu-Pro-Gly-Glu-Ala-Lys-Val-Gly；

多肽II：氨基酸序列為Gly-Leu-Pro-Gly-Glu-Ala-Lys-Ala-Gly；

多肽III：氨基酸序列為Gly-Leu-Pro-Gly-Glu-Val-Lys-Val-Gly；

多肽IV：氨基酸序列為Gly-Leu-Pro-Gly-Glu-Val-Lys-Ala-Gly。

2.一種分支多肽，其特征在于，所述分支多肽的結構式如式I、式II或式III所示：

其中，式I、式II、式III中所述肽鏈的氨基酸序列選自以下氨基酸序列中的一種：

序列I：氨基酸序列為Gly-Leu-Pro-Gly-Glu-Ala-Lys-Val-Gly；

序列II：氨基酸序列為Gly-Leu-Pro-Gly-Glu-Ala-Lys-Ala-Gly；

序列III：氨基酸序列為Gly-Leu-Pro-Gly-Glu-Val-Lys-Val-Gly；

序列IV：氨基酸序列為Gly-Leu-Pro-Gly-Glu-Val-Lys-Ala-Gly。

3.一種合成權利要求1所述多肽的方法，其特征在于，至少包括以下步驟：

(1)氨基酸-樹脂交聯：根據目標多肽的氨基酸序列，將C端第一位的氨基保護的氨基酸與樹脂混合，在交聯催化劑的存在下，得到惰性交聯產物；

(2)氨基酸N端去保護：將步驟(1)中得到的惰性交聯產物與去保護劑混合，得到活性交聯產物；

(3)氨基酸縮合反應：將步驟(2)中得到的活性交聯產物與氨基酸序列中C端下一位的氨基保護的氨基酸混合，在縮合催化劑的存在下，進行氨基酸的縮合反應；

(4)根據多肽固相合成法，按照目標多肽的氨基酸序列，重復步驟(2)的去保護和步驟(3)的氨基酸縮合反應，自C端向N端依次將目標多肽的氨基酸序列上的氨基酸同樹脂上的多肽縮合，直至形成目標多肽的氨基酸序列，得到目標多肽-樹脂交聯產物；

(5)目標多肽與樹脂分離：將步驟(4)得到的目標多肽-樹脂交聯產物與切割劑混合，使目標多肽與樹脂分離，經純化，得到目標多肽；

所述目標多肽的氨基酸序列選自以下氨基酸序列中的一種：

序列I：氨基酸序列為Gly-Leu-Pro-Gly-Glu-Ala-Lys-Val-Gly；

序列II：氨基酸序列為Gly-Leu-Pro-Gly-Glu-Ala-Lys-Ala-Gly；

序列III：氨基酸序列為Gly-Leu-Pro-Gly-Glu-Val-Lys-Val-Gly；

序列IV：氨基酸序列為Gly-Leu-Pro-Gly-Glu-Val-Lys-Ala-Gly。

4.根據權利要求3所述的方法，其特征在于，

所述樹脂為2-氯三苯甲基氯樹脂；

所述氨基保護的氨基酸為Fmoc-氨基酸；

所述交聯催化劑為N,N'-二異丙基乙胺；

所述去保護劑為哌啶；

所述縮合催化劑由1-羥基-苯并-三氮唑、苯并三唑四甲基四氟硼酸和N,N'-二異丙基乙胺組成；

所述切割劑為體積百分含量90％～99％的三氟乙酸水溶液。

5.根據權利要求4所述的方法，其特征在于，所述樹脂與所述縮合催化劑中的1-羥基-苯并-三氮唑的重量比為1:1～1:10，所述樹脂與所述縮合催化劑中的苯并三唑四甲基四氟硼酸的重量比為1:1～1:5，所述樹脂與所述縮合催化劑中的N,N'-二異丙基乙胺的重量比為1:0.1～1:1。

6.根據權利要求4所述的方法，其特征在于，所述樹脂與所述交聯催化劑N,N'-二異丙基乙胺的重量比為1:0.5；

所述樹脂與所述去保護劑哌啶的重量比為1:25；

所述樹脂與所述縮合催化劑中的1-羥基-苯并-三氮唑的重量比為1:1；

所述樹脂與所述縮合催化劑中的苯并三唑四甲基四氟硼酸的重量比為1:1.75；

所述樹脂與所述縮合催化劑中的N,N'-二異丙基乙胺的重量比為1:0.5；

所述切割劑為體積百分含量95％的三氟乙酸水溶液，切割條件為0℃下將所述切割劑與目標多肽交聯產物混合接觸2小時。