[發明專利]一種抗菌的諸葛菜人工種子制作方法

有效

• 申請號: 201610058789.5
• 申請日: 2016-01-28
• 公開（公告）號: CN105557528B
• 公開（公告）日: 2018-08-07
• 發明（設計）人: 吳沿友;谷睿智;邢德科;于睿;胡林生;吳沿勝;黎明鴻;姚香萍
• 申請（專利權）人: 江蘇大學
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

本發明公開了一種抗菌的諸葛菜人工種子制作方法，屬于生物技術和農業工程領域，本發明所述的方法包括諸葛菜的芽誘導、芽繁培養、芽的包埋和人工種子膠囊制備，所述芽的包埋和人工種子膠囊制備的過程中的包埋液是含納米二氧化鈦的質量濃度為7％海藻酸鈉水溶膠。根據本發明制作方法制作出來的人工種子，在有菌環境下生根發芽率高，污染率低，相比于添加傳統殺菌劑的人工種子具有抗菌效果更好，萌發率更高，對外植體毒害作用更低的特點，進一步將諸葛菜人工種子技術推向生產應用。

技術領域

本發明屬于生物技術和農業工程領域，具體涉及一種抗菌的諸葛菜人工種子的制作方法。

背景技術

諸葛菜屬于十字花科一、二年生草本植物，廣泛分布于我國東北、華北，適應性強，耐寒、耐旱、耐陰，病蟲害少。花呈紫色或白色，生活史從每年9月至次年6月，甚至在寒冷冬季仍可保綠不枯，可以較好地覆蓋地面，是北方地區不可多得的早春觀花，冬季觀綠的地被植物，因此深受人們喜歡。諸葛菜種子的脂肪酸組成中，芥酸、亞麻酸含量低，棕櫚酸、油酸和亞油酸的含量為總脂肪的89.8％，即諸葛菜為高亞油酸低芥酸種質，其種子油是品質優良的食用油，尤其適合心血管病患者食用。近年來諸葛菜在組織培養、體細胞雜交等方面的研究多有進展，諸葛菜人工種子技術也頗有進展，現在已經建立了一套較為完整的諸葛菜人工種子制作方法，但距離實際應用還有一定距離。

人工種子技術的實質就是將組織培養產生的外植體，如芽或胚狀體，包埋在人工制作的含有特定激素和營養的膠囊中，具有天然種子長成植株的功能。與天然種子不同，人工種子不受季節的影響，可以根據播種環境改變激素和營養物質配方，而且成本低廉，可控性強，研制成功必然會帶來一場農業革命。

防腐抗菌問題一直是阻礙人工種子技術大規模推廣的一大難題，常用殺菌劑如多菌靈、青霉素、先鋒霉素等均對植物有一定負面影響，并且單獨添加往往只能抵抗幾種菌類污染。目前諸葛菜人工種子只能在無菌條件下萌發，并未有人進行過諸葛菜人工種皮抗菌性研究，因此抗菌能力的研究已經成為推廣諸葛菜人工種子技術發展亟待解決的問題。

發明內容

本發明的目的在于提供一種抗菌的諸葛菜人工種子制作方法，制作出來的諸葛菜人工種子種皮具有較高的抗菌能力、種子可以在有菌環境中順利萌發，為諸葛菜人工種子技術進一步走向實際應用提供技術支持。

本發明采用具體技術方案為：

一種抗菌的諸葛菜人工種子的制作，包括步驟：

步驟1，諸葛菜的芽誘導：取諸葛菜幼苗,無菌水沖洗，切取腋芽和頂芽，消毒后進行芽誘導培養；

步驟2，諸葛菜的芽繁培養：取步驟1芽誘導培養的諸葛菜組培苗，切取幼芽，轉接到芽繁培養基上進行芽繁培養；

步驟3，諸葛菜芽的包埋和人工種子膠囊制備：取步驟2中在芽繁培養基上生長的幼芽，切取若干個一定長度的芽并逐個放在包埋液表面，所述包埋液是含納米二氧化鈦的質量濃度為7％海藻酸鈉水溶膠；用玻璃吸管先吸取少量包埋液，再吸入一個諸葛菜芽，然后滴入質量濃度為2％的CaCl₂溶液中，絡合反應形成固態人工種子，取出所述固態人工種子，于無菌水中清洗并吸干表面水分即可。

進一步，所述步驟1中的芽誘導培養使用的培養基的成分包括：MS培養基、2mg/L6-BA、0.2mg/L NAA、3％蔗糖、0.65％瓊脂；芽誘導過程的光照強度為2000～3000Lux日光燈照射12小時。

進一步，所述步驟2中的芽繁培養基的成分包括：MS培養基、2.5mg/L 6-BA、0.2mg/L NAA、3％蔗糖、0.65％瓊脂；芽繁培養的光照強度為2000～3000Lux日光燈照射12小時。

進一步，所述步驟3中在芽繁培養基上生長的幼芽生長時間為30天；切取若干個芽的長度為8mm。