[發明專利]用離子遷移譜儀檢測水體中17β-雌二醇的方法

在審

• 申請號: 201610056774.5
• 申請日: 2016-01-27
• 公開（公告）號: CN105675708A
• 公開（公告）日: 2016-06-15
• 發明（設計）人: 張偉;謝璀;王志琪;徐翔;張亦揚;劉朋;劉立秋
• 申請（專利權）人: 武漢矽感科技有限公司
• 主分類號: G01N27/64
• 分類號: G01N27/64;G01N1/28
• 代理公司: 深圳市中原力和專利商標事務所(普通合伙) 44289
• 代理人: 曹撫全;王英鴻

技術領域

本發明涉及17β-雌二醇檢測技術領域，尤其涉及一種用離子遷移譜儀檢測水體 中17β-雌二醇的方法。

背景技術

17β-雌二醇（17β-estradiol）,CAS號：50-28-2。是雌激素的一種,也是一種重 要的環境內分泌干擾物（EndocrineDisruptorChemicals,EDCs）。其中17β-雌二醇被 認為是對人體和動物內分泌系統危害最大的一種環境內分泌物。環境中的雌二醇主要來源 于動物排泄,以及含有人工合成激素藥物的使用和排放。排放的雌二醇主要進人污水系 統,并經污水處理廠處理后排放到地表水和沉積物中。雌二醇在環境中的危害極大,較低 的濃度即可對人身體健康造成明顯的影響.

當17β-雌二醇通過食物鏈從外部環境進入人體和其他生物體會干擾正常的生理過 程，影響人的生長發育，降低男性出生率，增長腫瘤的病發機會，近幾年關于其對人體傷害 的研究受到全世界的廣泛關注。

現有技術中，對于水體中雌二醇的檢測方法主要包括以氣相色譜-質譜法（GC- MS）、液相色譜-質聯法（LC-MS）為代表的色譜檢測方法，以及基于抗原抗體反應的免疫分析 方法。

例如，國外文獻中Anastasia等人采用衍生化試劑超聲輔助萃取氣質聯用的方法, 用于不同類型水樣，如超純水、人工海水、河水和海水中包括雌二醇在內目標化合物的回收 研究，用不同的萃取溶劑和SPE柱提純EDCs洗脫液，并評價了回收率，結果表明這種衍生方 法是用于氣質聯用分析雌激素的一種合適且有效的樣品處理方法。但是，該檢測方法比較 繁瑣且耗時長，所用的化學耗材也較多，如加入衍生試劑反應、超聲萃取時間以及最后過 SPE柱提純等。并不適合快速檢測。

例如，中國專利公開號101918098A公開了一種通過質譜法檢測樣品中雌二醇量的 方法。所述方法可包括：

（a）通過液相層析純化測試樣品中的雌二醇；液相層析步驟包括反相液相層析（RPLC）、 高效液相層析（HPLC）和高湍流液相層析（HTLC）；

（b）電離測試樣品中的雌二醇；

（c）通過質譜法檢測雌二醇離子（或多種）的量并且將檢測的雌二醇離子（或多種）的量 關聯到測試樣品中的雌二醇的量。

因該檢測方法主要檢測血液或血清中的雌二醇，純化樣品中的雌二醇為主要步 驟，但是純化過程相當繁瑣，如反相液相層析、高效液相層析和高湍流液相層析，耗時特別 長。且過程中需要不斷洗脫，耗費大量化學試劑如乙腈、甲醇、異丙醇、丙酮。且高湍流液相 層析需要購買額外的分析柱，增加過多的耗材，故不太適合大量快速的實驗室檢測。

例如，國外文獻中Koh等人也設計了一種離線SPE兩步提純分析方法,并與液相串 聯質譜聯用，測定了廢水中包括雌二醇在內的5種類固醇，實驗結果表明，使用恰當的提純 和氘代內標物，能克服基體效應對離子化的影響，在澄清的污水和最終的污水樣品中回收 率大于83%，相對標準偏差在0.5%～12%之間。但是，上述液質聯用、氣質聯用等方法雖成熟 并準確可靠，但檢測前的處理過程比較繁瑣，樣品都需要固相萃取柱和富集以及衍生，使用 的化學試劑和設備較多費力費時，在實際應用中需要昂貴復雜的儀器設備以及訓練有素的 技術人員，難以滿足大規模應用及實時原位檢測的需要。

例如，中國專利公告號201429596公開了一種檢測動物源性食品中雌二醇殘留的 ELISA檢測試劑盒。該試劑盒采用間接競爭ELISA方法，樣本中殘留的雌二醇將和預包被的 偶聯抗原競爭抗雌二醇抗體，加入酶標二抗后，用TMB底物顯色，樣本吸光度值與其所含雌 二醇的含量成負相關，與標準曲線比較再乘以對應的稀釋倍數，即可得出樣品中的雌二醇 殘留。

但是，該試劑盒的制作程序復雜、繁瑣，測試中的所需化學試劑較多，且前處理步 驟同樣比較復雜繁瑣，而且該方法易出現假陽性的結果，不能滿足實驗的穩定性。

例如，中國專利公開號103940867A公開一種用于檢測17β-雌二醇的光電適配體 傳感器的制備方法。所述光電適配體傳感器以硒化鎘納米粒子（CdSeNPs）修飾二氧化鈦納 米管（TiO2NTs）為基體電極，在二氧化鈦納米管內外修飾具有專一性識別能力的17β-雌 二醇適配體作為探針，并與光電分析技術結合構筑了一種簡單、快速的光電適配體傳感器， 所述光電適配體傳感器可實現高靈敏度和高選擇性檢測17β-雌二醇。