[發明專利]桃PpeAMT1;1基因、轉運蛋白、表達載體及其構建方法

在審

• 申請號: 201610055023.1
• 申請日: 2016-01-27
• 公開（公告）號: CN105524928A
• 公開（公告）日: 2016-04-27
• 發明（設計）人: 宋志忠;張斌斌;馬瑞娟;俞明亮
• 申請（專利權）人: 江蘇省農業科學院
• 主分類號: C12N15/29
• 分類號: C12N15/29;C12N15/81;C12N15/66;C07K14/415
• 代理公司: 南京申云知識產權代理事務所(普通合伙) 32274
• 代理人: 洪洋

技術領域

本發明涉及桃PpeAMT1；1基因、轉運蛋白、表達載體及其構建方法，屬于分子生物學和生物技術領域。

背景技術

銨離子(NH₄⁺)是最主要的無機氮存在形式，是植物優先吸收的氮素營養，與植物的生長、發育和果實品質密切相關。銨肥在促進果實品質與產量等生理方面起重要作用，施用適量銨肥不僅可以顯著地增強果實的內在品質，也可以改善了果實的外觀品質。然而，相關報道主要集中在生理生化層面，有關果實品質、產量與NH₄⁺的吸收、轉運及其代謝的分子機理的報道鮮少。

植物對NH₄⁺的吸收是依賴定位于細胞質膜上的AMT轉運體來實現完成的，分為AMT1和AMT2兩個基因亞族。Ninnemann等從擬南芥中克隆并鑒定了第一個植物AMT1成員基因，迄今為止，關于該類基因結構與功能的報道主要集中在一年生草本植物擬南芥、番茄、百脈根、油菜和水稻等為研究材料。報道顯示AMT1基因主要在一年生植物體的根部表現出高表達，主導根部NH₄⁺的吸收(Preferentialexpressionofanammoniumtransporterandoftwoputativenitratetransportersinroothairsoftomato,LauterFR,NinnemannO,BucherM,RiesmeierJW,FrommerWB,Proc.Natl.Acad.Sci.USA；Threefunctionaltransportersforconstitutive,diurnallyregulated,andstarvation-induceduptakeofammoniumintoArabidopsisroots,GazzarriniS,LejayL,GojonA,NinnemannO,FrommerWB,PlantCell；Differentialregulationofthreefunctionalammoniumtransportergenesbynitrogeninroothairsandbylightinleavesoftomato,vonWirénN,LauterFR,NinnemannO,GillissenB,Walch-LiuP,EngelsC,JostW,FormmerWB,PlantJournal；FunctionalcharacterizationofanammoniumtransportergenefromLotusjaponicas,SalveminiF,MariniAM,RiccioA,PatriarcaEJ,ChiurazziM,Gene；Distinctexpressionandfunctionofthreeammoniumtransportergenes(OsAMT1；1–1；3)inrice,SonodaY,IkedaA,SaikiS,vonWirénN,YamayaT,YamaguchiJ,PlantCellPhysiol)，或主要在葉片表達，主導地上部的轉運(FunctionalcharacterizationofanammoniumtransportergenefromLotusjaponicas,SalveminiF,MariniAM,RiccioA,PatriarcaEJ,ChiurazziM,Gene；Characterizationofthreefunctionalhigh-affinityammoniumtransportersinLotusjaponicuswithdifferentialtranscriptionalregulationandspatialexpression,D'ApuzzoE,RogatoA,Simon-RosinU,ElAlaouiH,BarbulovaA,BettiM,DimouM,KatinakisP,MarquezA,MariniAM,UdvardiMK,ChiurazziM,PlantPhysiology)。然而，植物AMT1家族基因成員的功能尚未完全清楚，AMT家族基因在果實發育及品質形成的具體功能及其調控機制更是未知的。由于木本植物具有多年生長的特性，具有與草本植物截然不同的氮素吸收轉運特點，它們的AMT同源基因調控方式與生理功能亦有所差別，因此，從木本植物果實中分離并鑒定新的AMT同源基因具有重要意義。

發明內容