[發(fā)明專利]禽結(jié)核高免血清及其制備方法有效
| 申請(qǐng)?zhí)枺?/td> | 201610053878.0 | 申請(qǐng)日： | 2016-01-26 |
| 公開（公告）號(hào)： | CN105504054B | 公開（公告）日： | 2020-09-01 |
| 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人： | 朱德康;陳泓汐;程安春;汪銘書;宋曉恒 | 申請(qǐng)（專利權(quán)）人： | 四川農(nóng)業(yè)大學(xué) |
| 主分類號(hào)： | C07K16/12 | 分類號(hào)： | C07K16/12;C07K16/06 |
| 代理公司： | 北京同恒源知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11275 | 代理人： | 趙榮之 |
| 地址： | 611130 四*** | 國省代碼： | 四川;51 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 結(jié)核 血清 及其 制備 方法 | ||
1.禽結(jié)核高免血清的制備方法，其特征在于，包括如下步驟：
A、免疫抗原的制備
a）將禽結(jié)核桿菌裝入50ml離心管中，8000g離心15min，巴氏吸管吸棄上清液；
b）加入滅菌后的PBS緩沖液，9000g離心15min，巴氏吸管吸棄上清液；
c）加入滅菌后的PBS緩沖液，10000g離心15min，巴氏吸管吸棄上清液；
d）加入質(zhì)量分?jǐn)?shù)0.3%的甲醛溶液，37℃培養(yǎng)箱放置24h，再室溫下放置24h；10000g離心15min，巴氏吸管吸棄上清液；
e）加入30ml滅菌后的PBS緩沖液，10000g離心15min，巴氏吸管吸棄上清液，重復(fù)操作至甲醛被洗凈；
f）加入滅菌后的PBS緩沖液制成OD600為0.5的懸浮液即可；
B、動(dòng)物免疫
選取2-3月齡健康雄性新西蘭兔，采用耳緣靜脈注射法進(jìn)行免疫，免疫程序具體為：
；
C、采血及血清收集
最后一次免疫結(jié)束7天后采取頸動(dòng)脈放血，血液37℃培養(yǎng)箱放置1h后，再4℃冰箱放置12h，離心收集血清，血清分裝后置于-80℃保存。
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