[發(fā)明專利]一種蘭屬雜交蘭的創(chuàng)制方法

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201610053360.7
• 申請(qǐng)日: 2016-01-26
• 公開（公告）號(hào): CN105580729A
• 公開（公告）日: 2016-05-18
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 王廣東;陳瑤瑤;張景華
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 南京農(nóng)業(yè)大學(xué)
• 主分類號(hào): A01H1/02
• 分類號(hào): A01H1/02
• 代理公司: 南京天華專利代理有限責(zé)任公司 32218
• 代理人: 蔣真

1.一種蘭屬雜交蘭的創(chuàng)建方法，其特征是包括親本大花蕙蘭、雜交蘭及 蕙蘭材料的溫室培養(yǎng)及開花調(diào)控的步驟：

a)母本材料的培養(yǎng)：以大花蕙蘭和雜交蘭品種為母本，生長(zhǎng)4-5年的成熟 植株種植于溫室中，冬春季節(jié)控制營(yíng)養(yǎng)生長(zhǎng)，控制N、P、K營(yíng)養(yǎng)水平，降低 氮素，提高磷鉀肥濃度，前期適當(dāng)控制溫度，3-4月份提高溫度，促進(jìn)其在春 季開花；

b)父本材料的培養(yǎng)：選擇多年生的蕙蘭為母本，通過N、P、K營(yíng)養(yǎng)及光 照和溫度控制，促進(jìn)蕙蘭于3-4月份開花；

c)雜交授粉：從父本蕙蘭開花株上用鑷子分離花粉塊，母本大花蕙蘭或雜 交蘭開花株上的單花開放后去掉花粉塊，授以父本蕙蘭的花粉塊，每朵花授以 蕙蘭花粉塊4-6個(gè)，以確保授粉；

d)子房和種子發(fā)育：授粉后的大花蕙蘭或雜交蘭一周后花瓣萎蔫，兩周后 能觀察到子房明顯膨大，剪去干枯花瓣和萼片，防止細(xì)菌和真菌的滋生；生長(zhǎng) 210-270天后，果莢變黃開裂前可以采收果莢。

2.根據(jù)權(quán)利要求書1所述蘭屬雜交蘭的創(chuàng)制方法，其特征在于所述親本大 花蕙蘭、雜交蘭及蕙蘭材料的溫室培養(yǎng)及開花調(diào)控的步驟之后還包括雜交后代 種子無菌播種的步驟：

e)無菌萌發(fā)培養(yǎng)基：以1/2MS或MS為基本培養(yǎng)基添加6-BA0.5-2.0 mg·L^-1和NAA0.5-2.0mg·L^-1；

f)無菌播種和萌發(fā)：采收成熟果莢，自來水沖洗后，在超凈工作臺(tái)進(jìn)行表 面滅菌處理，先用75％的乙醇處理1分鐘，再用1％的次氯酸鈉處理30-40分 鐘，無菌水沖洗3-4次，在無菌濾紙上切開果莢，取出種子，播種于萌發(fā)培養(yǎng) 基；

g)雜交后代植株再生：以MS為基本培養(yǎng)基添加NAA0.5-1.0mg·L^-1和 1.0-2.0mg·L^-1適宜原球莖發(fā)育和植株再生；

h)生根植株移栽：生根植株打開瓶口馴化3-5d，洗凈培養(yǎng)基后以800-1000 倍的百菌清處理1-3h，采用水苔為基質(zhì)移栽于2.5寸營(yíng)養(yǎng)缽，移栽后控制溫室 溫度在25℃，空氣相對(duì)濕度80％，20-30天以后長(zhǎng)出新根成活，生長(zhǎng)6個(gè)月后 植株進(jìn)一步移栽至較大營(yíng)養(yǎng)缽進(jìn)一步生長(zhǎng)。

3.根據(jù)權(quán)利要求書2所述蘭屬雜交蘭的創(chuàng)制方法，其特征在于所述步驟 e)、步驟g)和步驟h)中的培養(yǎng)基中均分別添加3％的蔗糖和100-150ml·L^-1椰 子汁，活性炭1-2％，pH值調(diào)至5.4-5.6，培養(yǎng)條件為光照1000lx，16h光周 期，25℃培養(yǎng)。