[發明專利]一種SiO2/GQDs–DNA–Au NPs納米復合材料及其制備方法和應用

有效

• 申請號: 201610051567.0
• 申請日: 2016-01-26
• 公開（公告）號: CN105572092B
• 公開（公告）日: 2018-09-18
• 發明（設計）人: 孔榮梅;裴海盟;渠鳳麗
• 申請（專利權）人: 曲阜師范大學
• 主分類號: G01N21/64
• 分類號: G01N21/64
• 代理公司: 青島發思特專利商標代理有限公司 37212
• 代理人: 鞏同海

1.一種SiO₂/GQDs–DNA–Au NPs納米復合材料在熒光生物傳感器上的應用，其特征在于，所述熒光生物傳感器用于靈敏檢測BLM，利用BLM·Fe(II)剪切DNA特定位點，使得Au NPs遠離SiO₂/GQDs，能量共振轉移減弱，對體系的熒光信號變化進行測定；

所述SiO₂/GQDs–DNA–Au NPs納米復合材料為GQDs偶聯在氨基化SiO₂納米球表面，并利用DNA兩端的-NH₂和-COOH使SiO₂/GQDs和Au NPs–DNA連接起來形成SiO₂/GQDs–DNA–Au NPs納米復合材料。

2.根據權利要求1所述的應用，其特征在于，所述SiO₂/GQDs–DNA–Au NPs納米復合材料中，GQDs的粒徑為1～2nm，氨基化SiO₂納米球的粒徑為80nm～1.2μm，Au NPs的粒徑為10～30nm，DNA的序列為5'-HS-(CH₂)₆-ATGCTATAATATTAAT-(CH₂)₆-NH₂-3'。

3.根據權利要求1或2所述的應用，其特征在于，所述SiO₂/GQDs–DNA–Au NPs納米復合材料的制備方法，包括如下步驟：

S01：將SiO₂納米球分散到GQDs溶液中，攪拌反應；其中，所述SiO₂納米球表面經氨基化處理，所述GQDs溶液用EDC和NHS活化；

S02：將80～100μL DNA慢慢加入1～2mL Au NPs中，4℃～8℃陳化15～20小時后，每隔7～9小時加入PB緩沖液和NaCl溶液進行老化，直至磷酸鹽終濃度為10～20mM，NaCl終濃度為0.2～0.4M，所得溶液經離心分離后，用緩沖液清洗底部紅色沉淀，然后將標記好的Au NPs–DNA重新分散于PBS緩沖液中，保存備用；

S03：將步驟S01所得SiO₂/GQDs和步驟S02所得Au NPs–DNA復合材料室溫下培養2～3小時后離心，得SiO₂/GQDs–DNA–Au NPs納米復合材料。

4.根據權利要求3所述的應用，其特征在于，步驟S01中，采用超聲使100～120mg氨基化SiO₂納米球和20～24mL濃度為1～4mg/mL活化的GQDs溶液形成均勻分散液，在低速攪拌下室溫避光反應20～25小時。

5.根據權利要求3所述的應用，其特征在于，步驟S02中，所述DNA的濃度是10μM，所述NaCl溶液的初始濃度是2M，所述PB緩沖液是0.1M Na₂HPO₄-KH₂PO₄，pH 8.0，所述PBS緩沖液是含0.2M NaCl的10mM Na₂HPO₄-KH₂PO₄，pH 7.4。

6.根據權利要求3所述的應用，其特征在于，步驟S03中，所述SiO₂/GQDs納米材料為80～120μL，所述Au NPs–DNA復合材料的體積為80～100μL。